[發明專利]一種蜂膠提取物中總黃酮含量的拉曼測定方法

在審

• 申請號: 202310251710.0
• 申請日: 2023-03-16
• 公開（公告）號: CN116297398A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 邵興軍;張迪;毛日文;仲延龍;朱惠芬
• 申請（專利權）人: 江蘇江大源生態生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/28;G01N1/34
• 代理公司: 上海海頌知識產權代理事務所(普通合伙) 31258
• 代理人: 季萍

本發明公開了一種蜂膠提取物中總黃酮含量的拉曼測定方法，包括：制備了針對蜂膠中黃酮檢測的金納米球、金屬?酚醛網絡、環氧樹脂和聚甲基丙烯酸甲酯?微針復合檢測材料，并依次建立了一種基于表面增強拉曼技術的蜂膠黃酮快速檢測方法，實現對蜂膠黃酮的快速定性判斷和定量檢測。

技術領域

本發明涉及食品快速檢測設備領域，具體為一種蜂膠提取物中總黃酮含量的拉曼測定方法。

背景技術

蜂膠藥用歷史悠久，含有豐富而獨特的生物活性物質，以黃酮類、酚酸類和萜烯類化合物為主。由于其廣泛的生物學活性而成為國內外研究與開發的熱點。黃酮含量是衡量蜂膠品質的重要指標，在蜂膠保健品的品質調控和產業化進程中起關鍵作用。然而，蜂膠產品質量良莠不齊，從外型、顏色和氣味上都很難鑒別良偽。因此，實現蜂膠中黃酮的快速定量檢測對判斷蜂膠品質具有重要價值。

現有的蜂膠黃酮檢測技術多為色譜技術，但其操作程序較復雜，無法實現便攜快速檢測。拉曼光譜技術已被用于檢測醋泥、枸杞、柑橘中的黃酮類物質，通過前處理和數學方法可以極大程度改善基質成分對拉曼信號的干擾。但在蜂膠檢測體系中，黃酮類和酚酸類物質的拉曼光譜信號存在嚴重重合，且其信號響應強度易受萜烯類、脂肪酸類物質影響。因此，需要開發一種蜂膠提取物中總黃酮含量的拉曼測定方法，為蜂膠品質控制和真假鑒別提供依據。

發明內容

本發明的目的在于提供一種蜂膠提取物中總黃酮含量的拉曼測定方法，。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種蜂膠提取物中總黃酮含量的拉曼測定方法，包括：制備了針對蜂膠中黃酮檢測的金納米球、金屬-酚醛網絡、環氧樹脂和聚甲基丙烯酸甲酯-微針復合檢測材料，并依次建立了一種基于表面增強拉曼技術的蜂膠黃酮快速檢測方法，實現對蜂膠黃酮的快速定性判斷和定量檢測。

作為本發明進一步的方案：具體步驟如下：

一、繪制蜂膠總黃酮標準曲線；

首先制備不同濃度的蘆丁標準溶液、金納米球、金屬-酚醛網絡、環氧樹脂和聚甲基丙烯酸甲酯-微針復合檢測材料；然后分別取不同濃度的蘆丁標準溶液，體積均相同，記為V1；將金納米球、金屬-酚醛網絡、環氧樹脂和聚甲基丙烯酸甲酯-微針復合檢測材料分別浸入V1體積的不同濃度標準溶液中，在室溫下進行孵化，取出后得到不同濃度標準溶液下的微針結合物；

待干燥后利用拉曼光譜儀掃描微針結合物獲得拉曼光譜圖；以特征拉曼峰作為定量基準峰，測定定量基準峰位移處的拉曼峰強度值I，以蘆丁標準溶液濃度與其相對應的拉曼峰強度值I繪制標準曲線。

作為本發明進一步的方案：步驟一中，所述蘆丁標準溶液濃度范圍為0～5mg/mL；所述蘆丁標準溶液的濃度為0.1～5mg/mL；所述金納米球、金屬-酚醛網絡、環氧樹脂和聚甲基丙烯酸甲酯-微針復合檢測材料用量與V1的比例為1片：10～20μL。

作為本發明進一步的方案：步驟一中，所述在室溫下進行孵化的時間為10～20s；所述拉曼特征峰為1580～1630cm^-1。

作為本發明進一步的方案：步驟一中，所述金納米球、金屬-酚醛網絡、環氧樹脂和聚甲基丙烯酸甲酯-微針復合檢測材料的具體制備方法如下：

a、制備金屬-酚醛網絡溶液：將聚乙烯吡咯烷酮和六水合氯化鐵加入到含有去離子水的燒瓶中，然后將鞣酸加入混合物中并在室溫下攪拌20mi?n；通過離心收集下層沉淀，離心條件為3000rpm/mi?n且10mi?n；并重懸于去離子水中，得到金屬-酚醛網絡溶液。

作為本發明進一步的方案：步驟a中，所述聚乙烯吡咯烷酮的濃度為1～4mg/mL，六水合氯化鐵的濃度為0.1～0.3mg/mL；鞣酸的濃度為0.1～1mg/mL；去離子水的用量為10～20mL；所述在室溫下攪拌的時間為10～20mi?n；所述離心的條件為2000～5000rpm/mi?n，5～10mi?n；