[發(fā)明專利]一種產(chǎn)泰樂菌素A的重組菌株及其生產(chǎn)泰樂菌素的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202310240302.5 | 申請日： | 2023-03-14 |
| 公開（公告）號： | CN116333958A | 公開（公告）日： | 2023-06-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 肖志宏;厲海笛;黃婷婷;林雙君;呂立獲 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江普洛生物科技有限公司;上海交通大學;普洛藥業(yè)股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/53;C12N15/76;C12P19/62;C12R1/465 |
| 代理公司： | 北京林達劉知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11277 | 代理人： | 李茂家;閆俊萍 |
| 地址： | 322109*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 產(chǎn)泰樂 菌素 重組 菌株 及其 生產(chǎn) 方法 | ||
1.一種生產(chǎn)泰樂菌素的重組微生物，其中，所述重組微生物與野生型菌株或出發(fā)菌株相比，具有如下(a)和/或(b)所示的特性：
(a)增強了甲基轉(zhuǎn)移酶酶活性和/或其編碼基因的表達水平；
(b)增強了細胞色素P450單加氧酶酶活性和/或其編碼基因的表達水平。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組微生物，其中，利用啟動子stnYp啟動所述甲基轉(zhuǎn)移酶編碼基因和/或細胞色素P450單加氧酶編碼基因的表達；
優(yōu)選地，所述啟動子stnYp包含如SEQ?ID?NO:1所示的序列。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組微生物，其中，串聯(lián)表達甲基轉(zhuǎn)移酶編碼基因和細胞色素P450單加氧酶編碼基因，且以啟動子stnYp啟動所述甲基轉(zhuǎn)移酶編碼基因和細胞色素P450單加氧酶編碼基因的表達。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項所述的重組微生物，其中，
所述甲基轉(zhuǎn)移酶包含如SEQ?ID?NO:3所示氨基酸序列的多肽，或包含與SEQ?ID?NO:2所示的核苷酸序列具有至少90％，可選至少95％，優(yōu)選至少97％，更優(yōu)選至少98％，最優(yōu)選至少99％的序列同一性的序列編碼的，且具有或部分具有如SEQ?ID?NO:3所示氨基酸序列的多肽活性的多肽；和/或，
所述細胞色素P450單加氧酶包含如SEQ?ID?NO:5所示氨基酸序列的多肽，或包含與SEQID?NO:4所示的核苷酸序列具有至少90％，可選至少95％，優(yōu)選至少97％，更優(yōu)選至少98％，最優(yōu)選至少99％的序列同一性的序列編碼的，且具有或部分具有如SEQ?ID?NO:5所示氨基酸序列的多肽活性的多肽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項所述的重組微生物，其中，以鏈霉菌或其他產(chǎn)泰樂菌素的菌株為出發(fā)菌株；優(yōu)選地，以星海灣鏈霉菌(Streptomyces?xinghaiensis)或其衍生菌株為出發(fā)菌株。
6.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項所述的重組微生物，其中，所述重組微生物為星海灣鏈霉菌(Streptomyces?xinghaiensis)菌株T0771，其保藏編號為CCTCC?NO:M?20222006。
7.一種多核苷酸，其包含：
(i)啟動子stnYp的核苷酸序列；
(ii)甲基轉(zhuǎn)移酶編碼基因的核苷酸序列；
(iii)細胞色素P450單加氧酶編碼基因的核苷酸序列。
8.一種表達載體，其包含如權(quán)利要求7所述的多核苷酸。
9.一種包含根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項所述的重組微生物的細胞培養(yǎng)物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項所述的重組微生物，根據(jù)權(quán)利要求7所述的多核苷酸、根據(jù)權(quán)利要求7所述的表達載體、或根據(jù)權(quán)利要求8所述的細胞培養(yǎng)物在生產(chǎn)泰樂菌素中的應(yīng)用。
11.一種生產(chǎn)泰樂菌素的方法，其中，包括培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項所述的重組微生物細胞或根據(jù)權(quán)利要求8所述的細胞培養(yǎng)物，以培養(yǎng)后的重組微生物細胞或細胞培養(yǎng)物生產(chǎn)泰樂菌素的步驟。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中，包括將所述菌株在含有碳源的發(fā)酵體系中培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項所述的重組微生物細胞；
優(yōu)選地，所述碳源包含可同化的碳源；
更優(yōu)選地，所述碳源包括但不限于葡萄糖、黃豆餅粉、玉米漿、玉米粉、酵母提取物、棉子糖、蔗糖、甘露醇、肌醇、淀粉中的至少一種。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的方法，其中，其還包括收獲在所述體系中收集的泰樂菌素。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于浙江普洛生物科技有限公司;上海交通大學;普洛藥業(yè)股份有限公司，未經(jīng)浙江普洛生物科技有限公司;上海交通大學;普洛藥業(yè)股份有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202310240302.5/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 肝泰樂生產(chǎn)廢液水解秸稈并用于酵母菌發(fā)酵產(chǎn)乙醇的方法
- 一種利用泰樂菌素發(fā)酵液提取泰樂堿的方法
- 從反萃取液中提取酒石酸泰樂菌素或磷酸泰樂菌素
- 一種泰樂菌素的半抗原、人工抗原、單克隆抗體及其制備方法與應(yīng)用
- 一種利用泰樂菌素發(fā)酵液生產(chǎn)無菌原料藥泰樂菌素鹽的方法
- 酒石酸泰樂菌素預(yù)混劑的制備方法
- 用泰樂菌素反萃取液制備含泰樂菌素的囊心物及其微囊
- 一種提高泰樂菌素發(fā)酵液質(zhì)量的發(fā)酵營養(yǎng)液及發(fā)酵方法
- 一種產(chǎn)酸克雷伯氏菌及其菌劑和應(yīng)用
- 菌株及其在發(fā)酵產(chǎn)泰樂菌素中的應(yīng)用
