[發(fā)明專利]一種檢測農(nóng)藥的比色傳感器、其制備方法及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310239563.5
• 申請日: 2023-03-14
• 公開（公告）號: CN116297429A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 侯秀丹;劉倩文;劉永超;楊慶利;葛家成
• 申請（專利權(quán)）人: 青島農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N33/53;G01N33/543;G01N21/31
• 代理公司: 山東三邦知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37308
• 代理人: 高洋

1.一種比色傳感器，其特征在于，由捕獲探針和信號探針組成；其中，捕獲探針選自Au-SSM膜材料修飾的帶有巰基的核酸適配體，即SH-aptamer-Au-SSM；信號探針選自AuPt@IL@Fe₃O₄納米材料修飾的帶有巰基的cDNA，即SH-cDNA-AuPt@IL@Fe₃O₄；

所述aptamer的核酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，所述cDNA的核酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比色傳感器，其特征在于，所述捕獲探針由如下方法制備而成：

首先，采用TCEP激活SH-aptamer，獲得SH-aptamer激活體系；然后，將Au-SSM膜材料與SH-aptamer激活體系混合，加水，在37℃下孵育；待孵育結(jié)束后，洗滌除去未結(jié)合的單鏈SH-aptamer，加入1％牛血清蛋白封閉未結(jié)合位點，形成SH-aptamer-Au-SSM，即所述捕獲探針。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的比色傳感器，其特征在于，所述Au-SSM膜材料由如下方法制備而成：

將金屬網(wǎng)剪成小圓片，即獲得SSM膜；然后將SSM膜置于稀鹽酸中腐蝕，至產(chǎn)生小氣泡后取出，清洗；將SSM膜加至3-氨丙基三乙氧基硅烷中，靜置，清洗，烘干；然后將SSM膜加至HAuCl₄中，先靜置，再震蕩，然后加冰硼氫化鈉震蕩，再靜置，最后將SSM膜取出，烘干，得到Au-SSM膜材料。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比色傳感器，其特征在于，所述信號探針由如下方法制備而成：

首先，采用TCEP激活SH-cDNA，獲得SH-cDNA激活體系；然后，將AuPt@IL@Fe₃O₄重懸于水中，獲得AuPt@IL@Fe₃O₄溶液；然后，將SH-cDNA激活體系加入到AuPt@IL@Fe₃O₄溶液中，在37℃下孵育；待孵育結(jié)束，將溶液磁分離，棄掉上清液，加水離心，除去未結(jié)合的單鏈SH-cDNA，加入1％牛血清蛋白封閉未結(jié)合位點，然后將沉淀沖洗分離，SH-cDNA-AuPt@IL@Fe₃O₄，即所述信號探針。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的比色傳感器，其特征在于，所述AuPt@IL@Fe₃O₄納米材料由如下方法制備而成：

將Fe₃O₄分散在鹽酸溶液中，超聲，將Fe₃O₄顆粒磁分離出來，洗滌；然后將Fe₃O₄顆粒分散在含有乙醇、水和濃氨水的混合溶液中，加入正硅酸乙酯(TEOS)，在室溫下攪拌，得到SiO₂@Fe₃O₄；將SiO₂@Fe₃O₄磁分離出來，洗滌，然后分散在含有濃氨水的乙醇溶液中，攪拌，加入離子液體，室溫攪拌反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束后，磁分離收集反應(yīng)產(chǎn)物，洗滌，得到IL@SiO₂@Fe₃O₄；將IL@SiO₂@Fe₃O₄與氫氧化鈉混合反應(yīng)，蝕刻SiO₂層，磁分離收集反應(yīng)產(chǎn)物，洗滌，干燥，獲得IL@Fe₃O₄；將IL@Fe₃O₄分散在檸檬酸三鈉溶液中，超聲，加入HAuCl₄溶液和檸檬酸三鈉溶液，煮沸至溶液呈酒紅色，之后加入氯鉑酸鉀和L-抗壞血酸，煮沸至溶液顏色為紅棕色，獲得AuPt@IL@Fe₃O₄溶液；將AuPt@IL@Fe₃O₄溶液離心，棄掉上清液，獲得AuPt@IL@Fe₃O₄納米材料。