[發(fā)明專利]一種胰腺癌免疫治療耐藥細(xì)胞系及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310167137.5
• 申請日: 2023-02-27
• 公開（公告）號: CN115975942B
• 公開（公告）日: 2023-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王飛;陳大衛(wèi);尚士潔;王瑞陽;張晶鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院（山東省腫瘤防治研究院;山東省腫瘤醫(yī)院）
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/02;C12R1/91
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11562
• 代理人: 程小芳

1.一種胰腺癌免疫治療耐藥細(xì)胞系PAN02-R，其特征在于，所述耐藥細(xì)胞系PAN02-R已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏日期為2023年1月8日，保藏編號為CCTCC?NO:C202310。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐藥細(xì)胞系PAN02-R，其特征在于，構(gòu)建方法包括以下步驟：

（1）利用胰腺癌細(xì)胞系PAN02構(gòu)建C57BL/6小鼠皮下瘤模型，給予免疫檢查點(diǎn)PD-1抗體治療，篩選治療后體積最大的腫瘤；

（2）無菌條件下分離篩選得到的體積最大的腫瘤組織，提取腫瘤原代細(xì)胞，對腫瘤原代細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)并傳代，利用所述腫瘤原代細(xì)胞繼續(xù)構(gòu)建小鼠皮下瘤模型，給予免疫檢查點(diǎn)PD-1抗體治療，篩選治療后體積最大的腫瘤；

（3）重復(fù)步驟（2）直至免疫檢查點(diǎn)PD-1抗體治療組的腫瘤體積與對照組相比無顯著差異，篩選治療組體積最大的腫瘤；

（4）無菌條件下分離步驟（3）中獲得的腫瘤組織，提取腫瘤原代細(xì)胞，對腫瘤原代細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)并穩(wěn)定傳代，即獲得胰腺癌免疫治療耐藥細(xì)胞系PAN02-R。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的耐藥細(xì)胞系PAN02-R，其特征在于，在步驟（1）中，所述胰腺癌細(xì)胞系為鼠源性胰腺癌細(xì)胞系。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的耐藥細(xì)胞系PAN02-R，其特征在于，在步驟（2）中，所述體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基為含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的耐藥細(xì)胞系PAN02-R，其特征在于，在步驟（4）中，所述培養(yǎng)的條件為37℃，CO₂體積濃度為5%。

6.一種如權(quán)利要求1所述的胰腺癌免疫治療耐藥細(xì)胞系PAN02-R在篩選抗胰腺癌藥物靶點(diǎn)中的應(yīng)用。

7.一種如權(quán)利要求1所述的胰腺癌免疫治療耐藥細(xì)胞系PAN02-R在篩選抗胰腺癌藥物中的應(yīng)用。

8.一種如權(quán)利要求1所述的胰腺癌免疫治療耐藥細(xì)胞系PAN02-R在篩選評估抗胰腺癌效果的檢測試劑中的應(yīng)用。

9.一種如權(quán)利要求1所述的胰腺癌免疫治療耐藥細(xì)胞系PAN02-R在制備評估抗胰腺癌效果的檢測試劑中的應(yīng)用。