[發明專利]一種化學成分限定培養基及應用

在審

• 申請號: 202310154948.1
• 申請日: 2023-02-22
• 公開（公告）號: CN116004517A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 王延濤;李國軍;戴秀秀;宋義高;吳書音
• 申請（專利權）人: 上海邁邦生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/02;C12N15/85
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 宋家會

1.一種化學成分限定培養基，其特征在于，由氨基酸、脂類、維生素、糖類、有機化合物和無機化合物組成；

所述氨基酸的組分和用量為：

所述脂類的組分和用量為：

所述維生素的組分和用量為：

所述糖類的組分和用量為：

所述有機化合物的組分和用量為：

所述無機化合物的組分和用量為：

2.根據權利要求1所述的化學成分限定培養基，其特征在于，所述化學成分限定培養基由第一化學成分限定培養基和第二化學成分限定培養基組成，且所述化學成分限定培養基中所述第一化學成分限定培養基的質量百分比為10％-90％；所述第二化學成分限定培養基的質量百分比為90％-10％；

所述第一化學成分限定培養基的組分和用量為：

其中，所述氨基酸的組分和用量為：

所述脂類的組分和用量為：

所述維生素的組分和用量為：

所述糖類的組分和用量為：

所述有機化合物的組分和用量為：

所述無機化合物的組分和用量為：

所述第二化學成分限定培養基的組分和用量為：其中，所述氨基酸的組分和用量為：

所述脂類的組分和用量為：

所述維生素的組分和用量為：

所述糖類的組分和用量為：

所述有機化合物的組分和用量為：

所述無機化合物的組分和用量為：

3.根據權利要求2所述的化學成分限定培養基，其特征在于，所述化學成分限定培養基中所述第一化學成分限定培養基的質量百分比為33％-90％；所述第二化學成分限定培養基的質量百分比為67％-10％。

4.根據權利要求3所述的化學成分限定培養基，其特征在于，所述化學成分限定培養基中所述第一化學成分限定培養基的質量百分比為33％-50％；所述第二化學成分限定培養基的質量百分比為67％-50％。

5.如權利要求1至4任一項所述的化學成分限定培養基的制備方法，其特征在于，包括：在水中按照配比加入各組分進行溶解，并調節溶液的pH和滲透壓，過濾得到所述化學成分限定培養基。

6.如權利要求1至4任一項所述的化學成分限定培養基在培養宿主細胞用于制備抗體、重組蛋白、疫苗、慢病毒包裝中的應用。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述抗體包括：CD20、PD-1、VEGF、TNF-α、Her2、CD47中的任一種；

所述重組蛋白包括：重組人凝血因子VIII、重組人胰島素、重組干擾素、重組白介素、重組粒細胞集落刺激因子、重組人生長激素中的任一種。

8.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述宿主細胞包括如下A～C中的至少一個特征：

A.所述宿主細胞為哺乳動物細胞；

B.所述哺乳動物細胞選自HEK293細胞；

C.所述HEK293細胞選自Expi293細胞、Freestyle293細胞中的任一種。

9.一種高效瞬轉表達方法，其特征在于，包括：

使用權利要求1至4任一項所述的化學成分限定培養基培養宿主細胞，得到細胞懸浮液；

將質粒和轉染試劑混勻后加入所述細胞懸浮液中；

將所述細胞懸浮液繼續培養，維持葡萄糖濃度在4g/L以上，當細胞活率低于70％時收獲細胞和上清培養液，得到表達產物。

10.根據權利要求9所述的高效瞬轉表達方法，其特征在于，所述質粒和所述轉染試劑的質量比為1:1-1:3；

所述質粒和所述轉染試劑混勻后孵育5-15min。