[發(fā)明專利]用于體外滲透實驗的離體皮膚的保存方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202310123449.6 | 申請日： | 2023-02-16 |
| 公開（公告）號： | CN115997758A | 公開（公告）日： | 2023-04-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 呂慧俠;凌佳偉;杜雅楠;盛雨澤 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國藥科大學(xué) |
| 主分類號： | A01N1/02 | 分類號： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200 | 代理人： | 唐循文 |
| 地址： | 210009 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 體外 滲透 實驗 皮膚 保存 方法 | ||
1.一種離體皮膚低溫儲存介質(zhì)，其特征在于：含有二甲亞砜和DMEM高糖培養(yǎng)基；按體積比計，二甲亞砜占5％-20％，DMEM高糖培養(yǎng)基占80％-95％；或含有甘油和DMEM高糖培養(yǎng)基，按體積比計，其中甘油占5％-20％，DMEM高糖培養(yǎng)基占80％-95％；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的離體皮膚低溫儲存介質(zhì)，其特征在于：按體積比計，二甲亞砜占10％，DMEM高糖培養(yǎng)基占90％；或甘油占10％，DMEM高糖培養(yǎng)基占90％；
3.權(quán)利要求1或2所述的離體皮膚低溫儲存介質(zhì)在SD大鼠和巴馬香豬離體皮膚保存中的應(yīng)用。
4.一種離體皮膚低溫儲存的方法，其特征在于：將離體皮膚置于權(quán)利要求1或2所述的離體皮膚低溫儲存介質(zhì)內(nèi)，在4℃冰箱孵育20min后，轉(zhuǎn)入-20℃冰箱凍存；所述的離體皮膚為SD大鼠和巴馬香豬離體皮膚。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：將離體皮膚置于權(quán)利要求1或2所述的離體皮膚低溫儲存介質(zhì)內(nèi)，在4℃冰箱孵育20min后，轉(zhuǎn)入-20℃冰箱降溫30min，最后放入-80℃冰箱凍存；所述的離體皮膚為SD大鼠和巴馬香豬離體皮膚。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其特征在于：
所述的SD大鼠離體皮膚由以下步驟制備獲得：
取皮：取體重200-220g的SD大鼠，按5mL/kg的劑量腹腔注射20％烏來糖溶液麻醉；固定于自制紙板上，使用寵物電推剪推去大鼠腹部毛發(fā)，再使用電動剃須刀輕緩地剃去細小絨毛；脫頸致死后，使用手術(shù)剪將去除毛發(fā)的腹部皮膚剪下；去脂肪：將剪下的鼠皮鋪展于濾紙上，角質(zhì)層朝向紙面，使用圖釘將鼠皮固定于紙面上；使用眼科彎鑷與眼科彎剪將脂肪與鼠皮真皮層分離剪下，備用；所述的巴馬香豬離體皮膚由以下步驟制備獲得：
一月半齡巴馬香豬氣體麻醉后，使用電推剪和剃須刀剃去豬毛，注射過量氯化鉀溶液執(zhí)行安樂死，使用手術(shù)刀將腹部、側(cè)面及背部皮膚整塊環(huán)切下來，清水沖洗皮膚外表面使用電動取皮機制得厚度約為0.8mm-1mm的豬皮。
7.一種離體皮膚低溫儲存后解凍復(fù)溫的方法，其特征在于：將權(quán)利要求4或5凍存后的離體皮膚，37℃恒溫水浴箱中快速解凍；待全部融化后，棄去離心管中的凍存液，加入DMEM高糖培養(yǎng)基，孵育3min后棄去；重復(fù)三次；用DMEM清洗后再用生理鹽水清洗。
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