[發(fā)明專利]一種同步檢測(cè)22種手足口病毒的檢測(cè)引物探針組合及基因芯片

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310101873.0
• 申請(qǐng)日: 2023-02-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116286803A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝俊;葛毅媛;馬曉敏;楊瑩;黃嘉慧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州凱普醫(yī)藥科技有限公司;武漢凱普醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司;廣東凱普生物科技股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12Q1/70;C12Q1/6837;C40B40/06;C12R1/93
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 覃蛟

1.一種同步檢測(cè)22種手足口病毒的檢測(cè)引物組合，其特征在于，22種手足口病毒包括13種柯薩奇病毒、1種腸道病毒和8種埃可病毒；

所述柯薩奇病毒包括CA2、CA4、CA5、CA6、CA7、CA9、CA10、CA16、CB1、CB2、CB3、CB4和CB5，所述腸道病毒為EV71，所述埃可病毒包括ECHO3、ECHO6、ECHO11、ECHO14、ECHO16、ECHO19、ECHO25和ECHO30；

所述檢測(cè)引物組合的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1～20所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)引物組合，其特征在于，所述檢測(cè)引物組合的5’端標(biāo)記有抗原；

優(yōu)選地，所述抗原為生物素、異硫氰酸熒光素(FITC)、羧基熒光素(FAM)、地高辛(DIG)和羧基四甲基羅丹明(TAMRA)中的任意一種。

3.一種同步檢測(cè)22種手足口病毒的檢測(cè)探針組合，其特征在于，22種手足口病毒包括13種柯薩奇病毒、1種腸道病毒和8種埃可病毒；

所述柯薩奇病毒包括CA2、CA4、CA5、CA6、CA7、CA9、CA10、CA16、CB1、CB2、CB3、CB4和CB5，所述腸道病毒為EV71，所述埃可病毒包括ECHO3、ECHO6、ECHO11、ECHO14、ECHO16、ECHO19、ECHO25和ECHO30；

所述檢測(cè)探針組合的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.23～44所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測(cè)探針組合，其特征在于，所述探針的5’端進(jìn)行氨基化處理或生物素修飾。

5.一種同步檢測(cè)22種手足口病毒的檢測(cè)引物探針組合物，其特征在于，其包括權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的檢測(cè)引物組合和權(quán)利要求3-4任一項(xiàng)所述的檢測(cè)探針組合。

6.一種基因芯片，其特征在于，含有權(quán)利要求3或4所述的檢測(cè)探針組合；

優(yōu)選地，所述基因芯片還包括檢測(cè)內(nèi)標(biāo)基因的探針和檢測(cè)生物素的探針，所述檢測(cè)內(nèi)標(biāo)基因的探針的核苷酸序列如SEQ?IDNO.45所示，所述檢測(cè)生物素的探針的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.46所示。

7.如權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的檢測(cè)引物組合和/或權(quán)利要求3-4任一項(xiàng)所述的檢測(cè)探針組合在制備檢測(cè)22種手足口病毒的試劑盒中的應(yīng)用。

8.如權(quán)利要求6所述的基因芯片在制備檢測(cè)22種手足口病毒的試劑盒中的應(yīng)用。

9.一種試劑盒，其特征在于，其包括如下產(chǎn)品中的至少一種：

權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的檢測(cè)引物組合、權(quán)利要求3-4任一項(xiàng)所述的檢測(cè)探針組合和權(quán)利要求6所述基因芯片。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括用于檢測(cè)內(nèi)標(biāo)基因的引物，所述檢測(cè)內(nèi)標(biāo)基因的引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.21-22所示；

優(yōu)選地，所述試劑盒還包括檢測(cè)內(nèi)標(biāo)基因的探針和檢測(cè)生物素的探針，所述檢測(cè)內(nèi)標(biāo)基因的探針的核苷酸序列如SEQ?IDNO.45所示，所述檢測(cè)生物素的探針的核苷酸序列如SEQID?NO.46所示；

優(yōu)選地，所述試劑盒還包括多重PCR的反應(yīng)液，所述多重PCR的反應(yīng)液包括PCR?Buffer、Q-solution、MgCl₂、dNTPs/dUTPs、酶混合液。