[發(fā)明專利]一種喀斯特高原湖泊水環(huán)境DNA樣品的現(xiàn)場采集方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202310083593.1 | 申請日： | 2023-02-08 |
| 公開（公告）號： | CN116296587A | 公開（公告）日： | 2023-06-23 |
| 發(fā)明（設計）人： | 邵儉;姚鄧雕;王藝舟;龐秀清;許龍飛;董響紅;王楨璐;張木子;楊原偉;姜海波 | 申請（專利權）人： | 貴州大學 |
| 主分類號： | G01N1/14 | 分類號： | G01N1/14;A61L2/18;A61L9/14;C12M1/26;C12M1/12;C12M1/00;A61L101/06 |
| 代理公司： | 北京紅梵知識產權代理事務所(普通合伙) 11912 | 代理人： | 李雅 |
| 地址： | 550025 *** | 國省代碼： | 貴州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 喀斯特 高原 湖泊 水環(huán)境 dna 樣品 現(xiàn)場 采集 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種喀斯特高原湖泊水環(huán)境DNA樣品的現(xiàn)場采集方法，其特征在于，包括以下步驟：
第一步，工作人員在采樣前須佩戴一次性無菌手套，在采樣點充分潤洗采水器和塑料桶3~5次；
第二步，用采水器采集水樣并倒入潤洗過的塑料桶內，裝2?L水于無菌廣口瓶中，隨后立即進行低溫避光保存處理；
第三步，使用隔膜真空泵和砂芯玻璃過濾裝置抽濾水樣，采用濾膜富集eDNA，進行抽濾工作之前須用1%次氯酸溶液對抽濾操作工作臺和周圍3?m內的空氣進行消毒，隨后進行真空抽濾；
第四步，抽濾工作完成后，水樣中的eDNA富集于濾膜上，用鑷子將濾膜卷起置于無菌離心管中在-20℃條件下保存。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種喀斯特高原湖泊水環(huán)境DNA樣品的現(xiàn)場采集方法，其特征在于：所述第二步中，若水深≤5?m，采集深度為1?m的水樣；若水深大于5?m且小于10?m，采集深度為1?m和5?m水深的水樣于桶內混合待用；若水深≥10?m，分別采集1?m、5?m、10?m水深水樣混合待用。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種喀斯特高原湖泊水環(huán)境DNA樣品的現(xiàn)場采集方法，其特征在于：所述第四步中，每一瓶樣品抽濾結束之后均用蒸餾水清洗砂芯玻璃并更換一次性無菌手套，設置1個空白對照。
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