[發明專利]M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用

在審

• 申請號: 202310073338.9
• 申請日: 2023-02-07
• 公開（公告）號: CN115998768A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 張春祥;李春紅;王敏睿;余烊
• 申請（專利權）人: 西南醫科大學
• 主分類號: A61K35/15
• 分類號: A61K35/15;A61K31/7105;A61P9/10;A61P9/06
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

本發明涉及分子生物技術領域，具體公開了M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用。本發明中的M2型巨噬細胞外泌體能夠用于制備治療心肌缺血再灌注損傷造成的心律失常的藥物，所述M2型巨噬細胞外泌體是利用白細胞介素?4刺激RAW264.7細胞并孵育而得。本發明中的M2型巨噬細胞外泌體可以通過其內包裹的長鏈非編碼RNA?Morrbid通過增強TRPV1表達，調控鈣離子通路而改善心肌缺血再灌注損傷小鼠心臟，從而緩解心律失常，本發明為以巨噬細胞來源的外泌體治療缺血再灌注損傷心律失常提供理論基礎和科學依據。

技術領域

本發明涉及分子生物技術領域，具體涉及M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用。

背景技術

心肌缺血再灌注損傷(MI/RI)是一種急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)，MI/RI后，無論是缺血心肌還是非缺血心肌，心臟電生理都發生了深刻的變化，導致復極異質性，引發室性心律失常(VAs)。室性心律失常可通過跨越不同異質復極區的多個折返回路來引發和維持，是世界范圍內死亡率和致殘率較高的疾病。目前廣泛應用的治療方法包括經皮冠狀動脈介入治療技術、抗血小板藥物和抗血栓藥物，但至今尚無有效的預防MI/RI后心律失常的策略。

大量研究表明，巨噬細胞可通過與心肌細胞形成縫隙連接促進房室結內的電傳導。當發生MI/RI時，來自體循環的大量單核細胞將聚集在心臟并分化為巨噬細胞，并比其他炎癥細胞更多地滲透到炎癥部位。在心臟募集后，巨噬細胞在免疫反應中比常駐巨噬細胞發揮更核心的作用。炎性巨噬細胞在MI/IR后心律失常中發揮關鍵作用，但其機制尚不清楚。

募集的巨噬細胞分為兩個亞型，即促炎的M1型巨噬細胞和抗炎的M2型巨噬細胞。M1型巨噬細胞產生促炎因子，如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素1β(IL-1β)和IL-6，并促進MI/RI進展。眾所周知，M2型巨噬細胞作為抗炎細胞發揮作用，分泌包括IL-10和IL-4在內的強大抗炎因子，抑制促炎因子的產生，阻斷炎癥反應，同時促進健康的組織重塑和組織修復。此前，幾項臨床研究提供的證據表明，炎性細胞因子的增加與心律失常密切相關。這些結果表明炎癥影響室性心律失常的發生和發展，VAs涉及底物觸發的心臟電和結構重構，炎癥有助于異位觸發的活動和折返的發生。據報道，炎性巨噬細胞在MI/IR后VAs發揮關鍵作用。此外，臨床研究表明，巨噬細胞或巨噬細胞分泌的炎性細胞因子升高與VAs密切相關

先前的研究證明，IR后心臟內各種細胞外囊泡(EV)的釋放顯著增加。眾所周知，EV是心臟生理學和病理學中生物信號傳導的有效傳播者。作為EV的一種，外泌體(直徑為30-200nm)可以被所有細胞分泌，它們通過將其內容物轉移到不同的細胞，影響基因轉錄和細胞增殖，從而在細胞間通訊中發揮重要作用。自外泌體被發現以來，其在心血管疾病中的研究引起了廣泛關注。外泌體可以在細胞間攜帶蛋白質、microRNA、非編碼RNA、DNA等多種基因藥物，因此也被稱為基因治療的“下一代”載體。

目前沒有發現M2型巨噬細胞外泌體對心肌缺血再灌注損傷誘發的心律失常的作用。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供了M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，本發明中的M2型巨噬細胞外泌體可以通過其內包裹的長鏈非編碼RNA?Morrbid通過增強TRPV1表達，調控鈣離子通路而改善心肌缺血再灌注損傷小鼠心臟，從而緩解心律失常，本發明為以巨噬細胞來源的外泌體治療缺血再灌注損傷心律失常提供理論基礎和科學依據。

本發明提供了M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用。

進一步地，所述M2型巨噬細胞外泌體用于制備治療心肌缺血再灌注損傷造成的心律失常的藥物。

進一步地，所述M2型巨噬細胞外泌體通過長鏈非編碼RNA?Morrbid激活心肌細胞線粒體上的TRPV1鈣離子通道，釋放線粒體內超載的鈣離子，調控線粒體內鈣穩態，實現對缺血再灌注后心律失常的有效治療。