[發明專利]M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用

在審

• 申請號: 202310073338.9
• 申請日: 2023-02-07
• 公開（公告）號: CN115998768A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 張春祥;李春紅;王敏睿;余烊
• 申請（專利權）人: 西南醫科大學
• 主分類號: A61K35/15
• 分類號: A61K35/15;A61K31/7105;A61P9/10;A61P9/06
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

1.M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用。

2.根據權利要求1所述的M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，其特征在于，所述M2型巨噬細胞外泌體用于制備治療心肌缺血再灌注損傷造成的心律失常的藥物。

3.根據權利要求1所述的M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，其特征在于，所述M2型巨噬細胞外泌體通過長鏈非編碼RNA?Morrbid激活心肌細胞線粒體上的TRPV1鈣離子通道，釋放線粒體內超載的鈣離子，調控線粒體內鈣穩態，實現對缺血再灌注后心律失常的有效治療。

4.根據權利要求1所述的M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，其特征在于，所述M2型巨噬細胞外泌體提取過程為：用白細胞介素-4刺激RAW264.7細胞，利用無血清培養基孵育后收集培養基，然后通過梯度離心法分離外泌體。

5.根據權利要求4所述的M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，其特征在于，所述梯度離心法分離外泌體過程為：將收集的培養基以2000g離心10min，然后以10000g離心30min以去除細胞碎片，然后，將上清液以2000g時濃縮8min至原始體積的30％，最后，將上清液120,000g離心70min，洗滌沉淀后獲得M2型巨噬細胞外泌體。

6.根據權利要求5所述的M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，其特征在于，用冷PBS洗滌沉淀。

7.根據權利要求4所述的M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，其特征在于，無血清培養基孵育后收集培養基的過程為：無血清培養基中孵育24h，收集培養基，用新鮮的無血清培養基代替，將培養物再孵育24h，然后再次收集培養基，將收集的兩體積的培養基混合在一起。

8.根據權利要求4所述的M2型巨噬細胞外泌體在制備治療心肌缺血再灌注損傷藥物中的應用，其特征在于，所述白細胞介素-4質量濃度為100ng/mL，所述RAW264.7細胞接種量為2.0×10⁶個/孔。