[發(fā)明專利]檢測(1-3)-β-D-葡聚糖含量的方法及其應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202310062031.9
• 申請日: 2023-01-16
• 公開（公告）號: CN115840038A
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發(fā)明（設計）人: 杜京堯;王新明;吳文娟;李博
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/577;G01N1/28
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿

1.免疫檢測的預處理試劑，其特征在于，包括酶解溶液、酸解溶液和中和溶液；

所述酶解溶液中的酶為蛋白酶K、細胞壁裂解酶、蝸牛酶、蛋白水解酶、淀粉酶、葡聚糖酶、纖維素酶、果膠酶、幾丁質(zhì)酶、酰胺水解酶中的任意一種或多種；

所述酸解溶液中的酸為氨基磺酸、鹽酸、硝酸或硫酸中的任意一種或多種；

所述中和溶液為磷酸鹽溶液、碳酸鹽溶液或Tris-HCl緩沖液和表面活性劑中的任意一種或多種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預處理試劑，其特征在于，所述酶解溶液中的酶為纖維素酶和酰胺水解酶，緩沖液為磷酸鹽溶液，其中酶的濃度為0.01～5U。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預處理試劑，其特征在于，所述酸解溶液為氨基磺酸溶液，其濃度為0.1～6.0M，pH值為-1.0～3.0。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預處理試劑，其特征在于，所述中和溶液為磷酸三鈉溶液或十二烷基硫酸鈉溶液，其濃度為0.1～6.0M，pH值為7.0～14.0。

5.試劑組合，其特征在于，包括權(quán)利要求1～4任一項所述的預處理試劑和免疫檢測試劑；

所述免疫檢測試劑包括ELISA檢測試劑、酶免疫分析試劑、免疫組織化學染色試劑、表面等離子共振試劑、膠乳凝集免疫分析試劑、化學發(fā)光免疫分析試劑、電化學發(fā)光免疫分析試劑、熒光抗體檢測試劑、放射免疫分析試劑、免疫沉淀檢測試劑、Western Blot法檢測試劑、免疫層析檢測試劑或高效液相層析法檢測試劑。

6.權(quán)利要求1～4任一項所述的預處理試劑或權(quán)利要求5所述的試劑組合在制備(1-3)-β-D-葡聚糖含量檢測的產(chǎn)品中的應用。

7.(1-3)-β-D-葡聚糖的檢測試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1～4任一項所述的預處理試劑和BG的ELISA檢測試劑，所述ELISA檢測試劑中捕獲抗體為固相抗BG抗體，檢測抗體為生物素標記的抗BG抗體或HRP標記的抗BG抗體。

8.權(quán)利要求7所述試劑盒的使用方法，其特征在于，包括對樣本進行預處理后進行免疫檢測；

所述預處理包括酶解孵育處理、酸解孵育處理和中和處理；

所述酶解孵育處理的溫度為2～40℃，時間為0.1～10min；

所述酸解孵育處理的溫度為2～40℃，時間為0.1～10min。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述酶解孵育處理的溫度為37℃，時間為1min；所述酸解孵育處理的溫度為37℃，時間為30s。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的方法，其特征在于，所述酶解孵育處理的酶解溶液與樣本的體積比為1:(0.2～10)；

所述酸解孵育處理的酸解溶液與樣本的體積比為1:(0.2～10)；

所述中和處理的中和溶液與樣本的體積比為1:(0.2～10)。