[發明專利]一種負載重組人松弛素-2的可吸入多孔微球及其制備方法

有效

• 申請號: 202310054616.6
• 申請日: 2023-02-03
• 公開（公告）號: CN115813865B
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發明（設計）人: 林貴梅;邱勝男;傅相蕾;趙小剛
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61K9/16
• 分類號: A61K9/16;A61K38/22;A61K47/34;A61K47/42;A61K9/72;A61P11/00
• 代理公司: 濟南格源知識產權代理有限公司 37306
• 代理人: 許靜

本發明涉及一種負載重組人松弛素?2的可吸入多孔微球及其制備方法，屬于生物醫藥技術領域。制備方法的步驟為：（1）將重組人松弛素?2溶解在含有牛血清白蛋白的PBS中，作為內部水相，將載體材料酯封端聚乳酸共聚物OH?PLGA75/25?COOR溶解在二氯甲烷中，作為油相；制備W1/O乳液；（2）將步驟（1）獲得的W1/O乳液注入PVA溶液中，制備負載RLX的無孔微球（RLX@SMs）；（3）將步驟（2）中獲得的RLX@SMs再采用程序降溫法制備負載重組人松弛素?2的多孔微球。本發明獲得的RLX@PMs具有較大的幾何直徑，可以長期釋放藥物，且其空氣動力學直徑較小，有利于在肺部深部的高沉積。

技術領域

本發明涉及一種負載重組人松弛素-2的可吸入多孔微球及其制備方法，屬于生物醫藥技術領域。

背景技術

特發性肺纖維化（IPF）導致肺功能惡化，目前還沒有針對該疾病病因的有效治療方法。重組人松弛素-2（RLX）是20世紀初發現的在孕期分娩前大量分泌的對產道有松弛作用的多肽類激素，可在多種組織器官內起到擴張血管、誘導細胞外基質降解以及逆轉成纖維細胞激活的作用，從而抑制纖維化發展，是一種很有前途的抗結構重塑和抗肺纖維化的生物治療候選藥物。然而，由于其為蛋白多肽類藥物，血液循環半衰期極短（約10分鐘），經靜脈注射后極少能到達靶器官發揮藥效，要達到最佳療效需要持續輸液或重復注射。

發明內容

本發明針對上述問題，提供了一種負載重組人松弛素-2（RLX）的可吸入多孔微球及其制備方法，本發明針對負載RLX的多孔微球（RLX@PMs），通過吸入給藥評估了其對IPF的治療效用。RLX@PMs具有較大的幾何直徑，作為RLX的藥物儲庫，可以長期釋放藥物，且由于其多孔結構，空氣動力學直徑較小，有利于在肺部深部的高沉積。結果顯示，藥物的釋放時間延長到了第24天，而且釋放的藥物保持了其肽的結構和活性。本發明的技術方案如下：

一種負載重組人松弛素-2的可吸入多孔微球的制備方法，步驟如下：

（1）將重組人松弛素-2（RLX）溶解在含有牛血清白蛋白（BSA）的PBS中，作為內部水相，并將載體材料酯封端聚乳酸共聚物OH-PLGA75/25-COOR溶解在二氯甲烷（DCM）中，作為油相；將內部水相加入到油相中，在10000?rpm的速度下高速剪切2分鐘后形成油包水(W1/O)乳液；以20%（v/v）的聚乙烯醇（PVA）溶液作為外部水相；

（2）將步驟（1）獲得的油包水(W1/O)乳液注入預先置于冰浴中預冷的20%（v/v）的PVA溶液中，利用高速剪切力混合乳化2分鐘，形成水包油?(O/W2)乳液，在冰水中攪拌，使DCM蒸發，通過5000-8000?rpm離心5-8分鐘收集無孔微球，用預先置于冰浴中預冷的去離子水洗，收集全部沉淀，即可得到負載RLX的無孔微球（RLX@SMs）；

（3）將步驟（2）中獲得的負載RLX無孔微球再采用程序降溫法制備負載重組人松弛素-2的多孔微球（RLX@PMs），具體步驟為：首先將收集的無孔微球在-20℃下冷凍4-6小時，然后立即轉移到-80℃冰箱中放置8小時，最后轉移至冷凍干燥機中進行24小時的冷凍干燥，即可得到多孔微球。

優選的，所述步驟（1）中將重組人松弛素-2（RLX）溶解在含有0.1%（v/w）的牛血清白蛋白（BSA）的PBS中。

優選的，所述步驟（1）中酯封端聚乳酸共聚物OH-PLGA75/25-COOR中LA：GA=75：25，分子量MW28500。

優選的，所述步驟（1）中將載體材料酯封端聚乳酸共聚物OH-PLGA75/25-COOR溶解在二氯甲烷（DCM）中，濃度為100?mg/mL，作為油相。

優選的，所述步驟（2）中水包油?(O/W2)乳液，在冰水中攪拌，使DCM蒸發，通過8000rpm離心5分鐘收集無孔微球。

優選的，所述步驟（2）中將收集的無孔微球用預先置于冰浴中預冷的去離子水洗洗三次。