[發(fā)明專利]lncRNACACF吸附miR-106a在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬誘導(dǎo)劑中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310032365.1
• 申請日: 2023-01-10
• 公開（公告）號: CN116004629A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王希龍;白國鋒;張豪;廖偉莉;袁曉龍;潘金春
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省實驗動物監(jiān)測所;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N5/071;C12N15/85;C12N15/64
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 張珍

本發(fā)明公開了lncRNACACF吸附miR?106a在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬誘導(dǎo)劑中的應(yīng)用。本發(fā)明采用細胞生物學(xué)的方法第一次證實了長鏈非編碼RNA?CACF在人臍靜脈內(nèi)皮細胞中競爭性吸附miR?106a，并通過GFP?mRFP?LC3標記法，證實了lncRNA?CACF吸附miR?106a促進人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬進程中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了lncRNA?CACF作為人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬誘導(dǎo)劑的新用途，以及miR?106a作為人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬抑制劑的新用途，有利于進一步開展人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬相關(guān)疾病發(fā)生、發(fā)展及治療的研究。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于細胞工程和基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及l(fā)ncRNA?CACF吸附miR-106a在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬誘導(dǎo)劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

心肌梗死(Myocardial?Infarction，MI)是一種嚴重危害人類健康的心血管疾病。促進MI后的血管新生能改善MI后的心臟功能。新生的血管是從已有的毛細血管或毛細血管后靜脈發(fā)展而來，主要包括血管內(nèi)皮細胞的增殖、出芽和遷移。自噬是將細胞內(nèi)受損的蛋白質(zhì)及細胞器運輸?shù)饺苊阁w進行消化降解的過程，是細胞的自我更新，能防止損傷的蛋白質(zhì)及細胞器的積累，現(xiàn)有研究認為，促進細胞自噬能改善心肌梗死后心功能恢復(fù)。

長鏈非編碼RNA(Long?Non-coding?RNA，lncRNA)是一類長度超過200nt的非編碼RNA，可作為重要調(diào)節(jié)因子參與到包括MI在內(nèi)的各種疾病的發(fā)生和/或發(fā)展中。研究表明，lncRNA可以通過競爭性吸附miRNA，抑制微小核糖核酸(microRNA，miRNA)對mRNA的降解作用，進而發(fā)揮其生理功能。lncRNA?CACF(Cardiac?autophagy?contributory?factor，暫命名)測序編號為lncRNA?XLOC_083933在心肌梗死后促進人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)的增殖和血管成型。但其對HUVECs細胞自噬的調(diào)控尚沒有報道。

miRNA是一類內(nèi)源性非編碼單鏈小分子RNA，長度約為22個核苷酸，可通過與信使核糖核酸(Messenger?Ribonucleic?Acid，mRNA)的3’非翻譯區(qū)(untranslated?region，UTR)不同程度的互補配對，誘導(dǎo)靶基因mRNA降解或抑制翻譯，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因的表達。現(xiàn)有研究表明miR-106a在多種癌細胞中通過調(diào)控細胞自噬來發(fā)揮作用，但目前尚無關(guān)于miR-106a對人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬調(diào)控的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

為解決相關(guān)問題，本發(fā)明的首要目的在于提供lncRNA?CACF在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬誘導(dǎo)劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一目的在于提供miR-106a在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬抑制劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明的再一目的在于提供lncRNA?CACF吸附miR-106a在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬誘導(dǎo)劑中的應(yīng)用。

為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

lncRNA?CACF在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬誘導(dǎo)劑中的應(yīng)用，體外環(huán)境下，lncRNACACF正調(diào)控人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬；通過調(diào)節(jié)lncRNA?CACF的表達水平，可實現(xiàn)人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬調(diào)控；所述的lncRNA?CACF如SEQ?ID?NO：1所示。

進一步地，增加外源性lncRNA?CACF，人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬小體增加；抑制lncRNA?CACF的表達，人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬小體減少。

進一步地，所述的lncRNA?CACF通過競爭性吸附miR-106a，實現(xiàn)人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬調(diào)控。

miR-106a在制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬抑制劑中的應(yīng)用，體外環(huán)境下，miR-106a負調(diào)控人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬；通過調(diào)節(jié)miR-106a的表達水平，可實現(xiàn)人臍靜脈內(nèi)皮細胞自噬調(diào)控。