[發明專利]lncRNACACF吸附miR-106a在制備人臍靜脈內皮細胞自噬誘導劑中的應用在審
| 申請號： | 202310032365.1 | 申請日： | 2023-01-10 |
| 公開（公告）號： | CN116004629A | 公開（公告）日： | 2023-04-25 |
| 發明（設計）人： | 王希龍;白國鋒;張豪;廖偉莉;袁曉龍;潘金春 | 申請（專利權）人： | 廣東省實驗動物監測所;華南農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N5/071;C12N15/85;C12N15/64 |
| 代理公司： | 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 | 代理人： | 張珍 |
| 地址： | 510663 廣東省廣州*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | lncrnacacf 吸附 mir 106 制備 靜脈 內皮 細胞 誘導劑 中的 應用 | ||
1.lncRNA?CACF在制備人臍靜脈內皮細胞自噬誘導劑中的應用，其特征在于：所述的lncRNA?CACF如SEQ?ID?NO：1所示。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：增加外源性lncRNA?CACF，人臍靜脈內皮細胞自噬水平增加；抑制lncRNA?CACF的表達，人臍靜脈內皮細胞自噬水平降低。
3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于：
所述的lncRNA?CACF通過競爭性吸附miR-106a，實現人臍靜脈內皮細胞自噬水平調控。
4.miR-106a在制備人臍靜脈內皮細胞自噬抑制劑中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：增加外源性miR-106a，人臍靜脈內皮細胞自噬水平降低；抑制miR-106a表達，人臍靜脈內皮細胞自噬水平上升。
6.根據權利要求2、3、5任一項所述的應用，其特征在于：
所述的增加外源性lncRNA?CACF通過基因過表達技術實現，采用的基因過表達載體通過如下方式制備得到：
(1)提取人臍靜脈內皮細胞的RNA，將其逆轉錄成cDNA，以cDNA為模板進行PCR擴增，得到目的片段；
(2)將目的片段連接到用限制性內切酶BamH?I和Xba?I酶切后的pcDNA3.1載體上，得到重組載體。
7.根據權利要求2、3、5任一項所述的應用，其特征在于：
所述的抑制lncRNA?CACF表達降低通過反義寡核苷酸實現，反義寡核苷酸序列如下：
5′-CGAAUCCACUUUCGCUUCUGAGAUUCACCGGCCUCACACUACCAAAUAGGAGAAAGUAAUCUGUGCAUUUCUUUCGCGUCUGAGAUUCACCGGCCUCCCUGGGCAGACAUUACCUGATT-3′。
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