[發明專利]一種藥用級間充質干細胞及其培養方法在審
| 申請號： | 202310019762.5 | 申請日： | 2023-01-06 |
| 公開（公告）號： | CN115960824A | 公開（公告）日： | 2023-04-14 |
| 發明（設計）人： | 王穎;曹毓琳;趙鵬偉;李偉 | 申請（專利權）人： | 唐頤控股（深圳）有限公司;上海唐頤惠科生物工程設備有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0775 | 分類號： | C12N5/0775;C12Q3/00;C12M1/02;C12M1/04;C12M1/34;C12M1/36;C12M1/38;C12M3/00;C12M1/00 |
| 代理公司： | 北京維正專利代理有限公司 11508 | 代理人： | 施青青 |
| 地址： | 518051 廣東省深圳市南山區粵海街道麻嶺*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 藥用 級間充質 干細胞 及其 培養 方法 | ||
1.一種藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，
將密度為（4-6）×104個/mL的間充質干細胞接種于裝有溶脹完全的微載體的生物反應器中，設置生物反應器工藝控制參數，包括溫度37℃，pH?7.2-7.4，溶氧濃度20-30%以及采用間歇式攪拌方式和持續性攪拌方式結合的攪拌方式，擴增培養，制得藥用級間充質干細胞；
所述間歇式攪拌方式為：以20~40?rpm的轉速攪拌5~10?min，停止50~55?min，攪拌循環次數為1~5次；所述持續性攪拌方式為：以30rpm的轉速攪拌至培養結束。
2.根據權利要求1所述的藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，所述間充質干細胞的擴增倍數達到10倍以上，細胞活性達到90%以上。
3.根據權利要求1所述的藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，所述生物反應器選擇500mL生物反應器、5L生物反應器和12.5L生物反應器；
所述5L生物反應器中，所述持續性攪拌方式為：以35rpm的轉速攪拌至培養結束；
所述12.5L生物反應器中，所述持續性攪拌方式為：以40rpm的轉速攪拌至培養結束。
4.根據權利要求1所述的藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，所述生物反應器為級聯放大培養體系，所述級聯放大培養體系包括依次并列設置的500mL生物反應器、5L生物反應器和12.5L生物反應器；
所述5L生物反應器中，所述持續性攪拌方式為：以35rpm的轉速攪拌至培養結束；
所述12.5L生物反應器中，所述持續性攪拌方式為：以40rpm的轉速攪拌至培養結束。
5.根據權利要求4所述的藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，經過所述級聯放大培養體系培養后，所述間充質干細胞的擴增倍數達到1000倍以上。
6.根據權利要求1所述的藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，所述生物反應器包括設置于生物反應器內部的攪拌槳；所述攪拌槳包括沿其軸線方向周向設置的漿葉；所述槳葉沿攪拌槳的軸向方向傾斜設置，傾斜角為30°，數量為8個。
7.根據權利要求1所述的藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，所述生物反應器中，通過向所述生物反應器內通入空氣和氧氣來調控培養體系內的溶氧濃度。
8.根據權利要求1所述的藥用級間充質干細胞的培養方法，其特征在于，所述生物反應器中，通過向所述生物反應器內通入二氧化碳氣體、酸液或堿液來調控培養體系內的pH。
9.一種利用權利要求1-8中任一項所述藥用級間充質干細胞的培養方法制得的藥用級間充質干細胞。
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