[發明專利]一種特異性結合E2-E2抗體復合物的抗體及其應用

在審

• 申請號: 202310014675.0
• 申請日: 2023-01-05
• 公開（公告）號: CN116041527A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 高莉;楊麗芳;邱仁冬;杜凱;李婷華
• 申請（專利權）人: 深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C12N15/13;G01N33/74;G01N33/577;G01N33/551
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 王玉桂;牛利民

本申請提供了特異性結合E2?E2抗體復合物的抗體及其應用。本申請提供的抗E2?E2抗體復合物的抗體能夠與E2?E2抗體特異性結合，具有較好的結合活性和親和力。通過使用本申請中的抗體進行夾心法檢測E2，大大提高了E2檢測的靈敏度和抗干擾能力，并且提高了低值樣本的檢出率。

技術領域

本發明涉及生物技術和醫學技術領域，尤其是涉及一種抗雌二醇(E2)-雌二醇抗體復合物的抗體及其應用。

背景技術

雌二醇(Estradiol，E2)是固醇類激素，其基本骨架為甾體結構，即環戊烷多氫菲，由三個環己烷和一個環戊烷稠合而成。雌二醇是雌激素中最主要且生物活性最強的激素，其對哺乳動物的生殖系統、免疫反應和基因表達等方面起著重要作用。在血液中E2在男女的各種臨床狀況中均是重要的診斷標志物。

臨床上，E2水平用于評估女性的月經失調，性早熟或青春期延遲以及卵巢功能，多毛癥、多囊卵巢綜合癥，同時在妊娠相關疾病監測中，監測整個妊娠期間的E2水平，聯合孕酮和抑制素B水平，預測妊娠患者葡萄胎的風險。男性E2的檢測可用于男性乳房發育評估，青春期延遲或不育等。

目前臨床上檢測E2的主流方法學為免疫分析法，由于E2屬于激素類小分子化合物，抗原決定簇單一，無法支持兩個不同的抗體進行夾心檢測，因此臨床免疫測定一般采用競爭法。

然而，競爭法檢測小分子抗原存在靈敏度和抗干擾能力差的問題，尤其是對低值樣本檢出能力較差。因此亟需解決現有競爭法檢測E₂的靈敏度低、抗干擾能力差的問題，并提高低值樣本的檢出率。

目前較為可行復合物抗體夾心法，具體的檢測原理為，一株抗E2抗體(第一抗體)與待測抗原形成免疫復合物，另一株抗復合物抗體(第二株抗體)與前述免疫復合物結合形成免疫夾心復合物，識別位點為第一株抗體和小分子半抗原結合后形成的新表位，且要求復合物抗體與游離的第一株抗體和小分子半抗原均無結合。通過復合物抗體夾心法的運用，可以極大提高小分子抗原檢測的靈敏度和準確度。然而篩選復合物抗體的難度較大，適用于夾心法的高親和力復合物抗體目前暫未有報道。

發明內容

以下是對本文詳細描述的主題的概述。本概述并非是為了限制權利要求的保護范圍。

本申請提供了一種抗雌二醇(E2)-雌二醇抗體復合物的抗體及其應用。本申請提供的抗雌二醇(E2)-雌二醇抗體復合物的抗體能夠與E2抗原特異性結合，具有較好的結合活性和親和力。通過使用本申請中的抗體進行夾心法檢測E2，大大提高了夾心法檢測的檢測靈敏度和抗干擾能力，并且提高了低值樣本的檢出率。

在一個方面中，本申請提供了一種特異性結合E2-E2抗體復合物的抗體或其功能性片段，所述抗體或其功能性片段包括以下互補決定區：

互補決定區CDR1-VH，其氨基酸序列為SYGVH(SEQ?ID?NO:1)；

互補決定區CDR2-VH，其氨基酸序列為VIWX₁GGSTNYNSALMS(SEQ?ID?NO:19)，其中X₁是A或G；

互補決定區CDR3-VH，其氨基酸序列為X₂EGX₃AX₄AMDY(SEQ?ID?NO:20)，其中X₂是D或G，X₃是Y、S或T，X₄是G或Y；

互補決定區CDR1-VL，其氨基酸序列為RASESVDNFGISFMN(SEQ?ID?NO:8)；

互補決定區CDR2-VL，其氨基酸序列為X₅ASNQGS(SEQ?ID?NO:21)，其中X₅是A或T；