[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)莫匹羅星的發(fā)酵培養(yǎng)基及莫匹羅星的生產(chǎn)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211744274.2
• 申請(qǐng)日: 2022-11-01
• 公開（公告）號(hào): CN115820763A
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐浩;徐美冬;高立;陳志立;毛亮亮;楊小虎;孫鵬;楊志清
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江海正藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): C12P17/16
• 分類號(hào): C12P17/16;C12N1/20;C12R1/39
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)莫匹羅星的發(fā)酵培養(yǎng)基及莫匹羅星的生產(chǎn)方法。本發(fā)明通過對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基及莫匹羅星生產(chǎn)方法的改進(jìn)，顯著提高莫匹羅星發(fā)酵水平，在發(fā)酵5?7天時(shí)，發(fā)酵效價(jià)達(dá)到12000mg/L以上。整個(gè)生產(chǎn)過程發(fā)酵物料廉價(jià)易得，發(fā)酵過程簡單易操作,有利于工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種生產(chǎn)莫匹羅星的發(fā)酵培養(yǎng)基及莫匹羅星的生產(chǎn)方法。

背景技術(shù)

莫匹羅星(Mupirocin)又稱假單胞菌酸A，是由熒光假單胞菌發(fā)酵產(chǎn)生的一種局部外用抗菌藥物，能抑殺多種引起皮膚性疾病的細(xì)菌，適用于毛囊炎、癤腫和膿皰病等皮膚病，具有簡單易用，經(jīng)濟(jì)便宜和副作用小等優(yōu)點(diǎn)。

目前，莫匹羅星的生產(chǎn)主要通過微生物發(fā)酵的方法進(jìn)行。莫匹羅星的提純工藝和藥物制備工藝報(bào)道較多，但關(guān)于莫匹羅星的發(fā)酵生產(chǎn)工藝報(bào)道較少。CN108277243A報(bào)道了一種通過發(fā)酵過程中補(bǔ)加亞油酸和亮氨酸混合物并流加氨水和檸檬酸鈉控制發(fā)酵pH 5.5-5.8的方法來生產(chǎn)假單胞菌酸A，采用該方法假單胞菌酸A最終發(fā)酵效價(jià)達(dá)到3462mg/L，該方法雖然能提升發(fā)酵效價(jià)，但補(bǔ)料和發(fā)酵過程控制工藝復(fù)雜，成本較高，而最終發(fā)酵效價(jià)仍然不理想。CN108949845A報(bào)道了一種用了制備莫匹羅星的發(fā)酵培養(yǎng)基及由發(fā)酵培養(yǎng)基制備莫匹羅星的方法，該報(bào)道里的發(fā)酵培養(yǎng)基物料復(fù)雜，操作繁瑣，發(fā)酵效價(jià)達(dá)到6000mg/L左右。CN111996136A報(bào)道了一種在發(fā)酵培養(yǎng)基種添加鉬酸鈉和尿素的方法生產(chǎn)莫匹羅星的方法，發(fā)酵效價(jià)最高達(dá)到6600mg/L左右。雖然與對(duì)照組相比發(fā)酵效價(jià)有了一定提升，但考慮到鉬酸鈉可能會(huì)導(dǎo)致鉬中毒，操作使用過程較為繁瑣，該方法發(fā)酵效價(jià)仍然不是十分理想。

鑒于上述現(xiàn)狀，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出一種生產(chǎn)莫匹羅星的發(fā)酵培養(yǎng)基及莫匹羅星的生產(chǎn)方法。本發(fā)明通過對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基及莫匹羅星生產(chǎn)工藝的改進(jìn)，顯著提高莫匹羅星的發(fā)酵水平，在發(fā)酵5-7天，發(fā)酵效價(jià)達(dá)到12000mg/L以上，且整個(gè)生產(chǎn)過程發(fā)酵物料廉價(jià)易得，發(fā)酵過程簡單易操作，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供一種生產(chǎn)莫匹羅星的發(fā)酵培養(yǎng)基，包括：葡萄糖80-120g/L、黃豆餅粉20-60g/L、棉籽餅粉10-30g/L、硫酸銨1-3g/L；優(yōu)選地，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基，包括：葡萄糖100g/L、黃豆餅粉40g/L、棉籽餅粉20g/L、硫酸銨1g/L，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值為7.5±0.1。

本發(fā)明還提供一種莫匹羅星的生產(chǎn)方法，包括：以保藏編號(hào)為CGMCC No.25307的熒光假單胞菌(Pseudomonas fluuorescens)HS-PF20-62為生產(chǎn)菌種，采用本發(fā)明如上所述發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。優(yōu)選地，所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為21℃-23℃。優(yōu)選地，在所述發(fā)酵培養(yǎng)第48-96小時(shí)進(jìn)行分批補(bǔ)料，其特征在于所述補(bǔ)料的物質(zhì)為葡萄糖溶液；優(yōu)選地，在所述發(fā)酵培養(yǎng)第48小時(shí)和第96小時(shí)分批補(bǔ)加葡萄糖溶液，每次補(bǔ)加葡萄糖溶液的體積為原發(fā)酵培養(yǎng)基體積的4％，所述葡萄糖溶液的質(zhì)量百分比濃度為50％。

本發(fā)明熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)HS-PF20-62的微生物菌種于2022年7月15日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所)，保藏編號(hào)為CGMCC No.25307，分類命名為熒光假單胞菌Pseudomonas fluorescens，并登記入冊(cè)，證明存活。

作為本發(fā)明實(shí)施方式之一，所述的莫匹羅星的生產(chǎn)方法具體如下：

步驟(1)菌種活化：將低溫保藏的保藏編號(hào)為CGMCC No.25307的熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)HS-PF20-62接種到平板培養(yǎng)基上，在26±1℃條件下培養(yǎng)24±4小時(shí)，得到涂布單菌落；