[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211722970.3
• 申請(qǐng)日: 2022-12-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116399673A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-07-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 單翔;樂(lè)聰;徐寧;康明珠;陳瑤瑤;高立文
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 蘇州藥明康德新藥開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N1/30
• 分類(lèi)號(hào): G01N1/30;G01N1/28
• 代理公司: 上海市匯業(yè)律師事務(wù)所 31325
• 代理人: 王函

1.一種用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一、將低滲液加入重懸細(xì)胞中，進(jìn)行一次孵育；

步驟二、向一次孵育后的細(xì)胞中加入固定液，進(jìn)行二次孵育；

步驟三、將二次孵育后的細(xì)胞制片，將細(xì)胞玻片浸入1～20％的染色液中1～20min，即可。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：包括如下步驟：

步驟一、將低滲液加入重懸細(xì)胞中進(jìn)行一次孵育，一次孵育時(shí)至少進(jìn)行一次混懸操作；

步驟二、向一次孵育后的細(xì)胞中加入固定液，離心得到重懸細(xì)胞；再加入固定液，進(jìn)行二次孵育；

步驟三、將二次孵育后的細(xì)胞制片，將細(xì)胞玻片浸入1～20％的染色液中1～20min，即可。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述步驟一中重懸細(xì)胞的制備過(guò)程為：將細(xì)胞吹打分散，細(xì)胞篩過(guò)濾，離心，即得。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述步驟一中低滲液的溫度為30～40℃，所述一次孵育的孵育溫度為35～40℃，所述一次孵育的孵育時(shí)間為5～40min；

所述步驟二中固定液的溫度為-4～10℃，所述二次孵育的孵育溫度為35～40℃，所述二次孵育的孵育時(shí)間為5～40min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述步驟一中低滲液的溫度為35～38℃，所述一次孵育的孵育溫度為36～38℃，所述一次孵育的孵育時(shí)間為20～30min；

所述步驟二中固定液的溫度為-2～4℃，所述二次孵育的孵育溫度為36～38℃，所述二次孵育的孵育時(shí)間為20～30min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述步驟二中固定液為甲醇和冰醋酸的混合溶液；

所述步驟三的染色液為姬姆薩染色液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述固定液中為甲醇與冰醋酸的體積比為(0.1～10):1；

所述染色液為5～15％的姬姆薩染色液，所述染色液的染色時(shí)間為5～15min。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述固定液中為甲醇與冰醋酸的體積比為(1～5):1；

所述染色液為5～10％的姬姆薩染色液，所述染色液的染色時(shí)間為5～10min。

9.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述步驟三中細(xì)胞制片的過(guò)程為：將二次孵育的細(xì)胞離心去除上清液，再加入固定液，離心去除上清液制得細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液滴至載玻片，即得。

10.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于優(yōu)化遺傳毒理染色體畸變?cè)囼?yàn)的細(xì)胞處理方法，其特征在于：所述細(xì)胞為骨髓細(xì)胞。