[發明專利]一種輔酶Q10的分離純化方法

有效

• 申請號: 202211705433.8
• 申請日: 2022-12-29
• 公開（公告）號: CN115819211B
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發明（設計）人: 唐林志;呂思敏;石愛云;莫新寶;何耀文;程鳳森
• 申請（專利權）人: 廣東潤和生物科技有限公司
• 主分類號: C07C46/10
• 分類號: C07C46/10;C07C50/28
• 代理公司: 廣州瑞之凡知識產權代理事務所(普通合伙) 44514
• 代理人: 黃愛君

本發明公開了一種輔酶Q10的分離純化方法，將輔酶Q10發酵液加入pH調節劑a調節pH，進行板框過濾；收集菌絲進行壓榨，除去大部分水分，得到濕菌絲；取上述濕菌絲，加入萃取劑進行打漿萃取，所述萃取劑選自溶液a和溶液b的組合，所述萃取劑a選自包含抗氧化劑的pH為8?12的水溶液；所述溶劑b選自正己烷、石油醚中的一種或兩種且包含相轉移萃取添加劑；通過在打漿萃取劑中添加一定比例的相轉移固相萃取劑，可以實現對濕菌絲的高效萃取，提高了萃取效率，縮短了萃取時間，解決了正己烷萃取濕菌絲效率低的技術問題，輔酶Q10經過本發明工藝進行多步驟分離純化后，產品總收率提升效果明顯，經濟效益顯著。

技術領域

本發明涉及有機天然產物的純化方法領域，具體涉及一種從微生物發酵法獲得的菌絲體中分離純化輔酶Q10的方法。

背景技術

輔酶Q10，化學名稱為2-[(全-E)3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-十甲基-2,6,10，14,18,22,26,30,34,38-四十癸烯基}-5,6-二甲氧基-3-甲基-p-苯醌，簡稱為CoQ10，又稱泛醌，是存在于人體所有細胞中的脂溶性抗氧化劑，其結構如式I所示：

輔酶Q10能激活人體細胞和細胞能量的營養，具有提高人體免疫力、增強抗氧化、延緩衰老和增強人體活力等功能，醫學上廣泛用于心血管系統疾病，國內外廣泛將其用于營養保健品及食品添加劑。人體可自行合成輔酶Q10，但隨著年紀增長，合成效率也會變差，據報導，缺乏輔酶Q10雖不至危及生命，但卻會嚴重影響到身體產生能量的機制，與正常人相比，體力可差28倍之多。此外，大量的動物研究及人體實驗證實，輔酶Q10可以有效降低肌肉損傷及發炎反應，同時能減緩運動后細胞激素的增加，提高抗氧化能力，具有提升運動表現的效果。因此，輔酶Q10深受廣大專業運動員和健身愛好者的喜愛。

輔酶Q10的生理功能被不斷的深入研究和開發，使輔酶Q10的應用領域不斷拓寬，需求市場逐年增長，研究者一直致力于生產方法和工藝的開發和優化。輔酶Q10的產業化工藝包括微生物發酵法、生物提取法、細胞培養法和化學合成法，其中在產業化應用最主要的為微生物發酵法。

生產輔酶Q10，無論是最初的生物提取法，細胞培養法，還是現在主流的微生物發酵法，都需要將產品從原料中分離出來，進一步進行純化、精制得到輔酶Q10的產品。因此，輔酶Q10的提取純化工藝在產業化生產過程中非常關鍵和重要。微生物發酵法，一般采用的是微生物菌株進行種子的培養，包括一級種子和二級種子的培養，然后進行大罐發酵培養，在培養過程中需要不斷的補充營養物質和前體物質，促進產物的產生。發酵液培養到一定程度，進行放罐處理。微生物發酵法得到的產物為含有一定菌濃的發酵液，發酵液需要先經過過濾或是離心得到濕菌絲體，以濕菌絲體或者將所述濕菌絲體干燥后再通過萃取、層析純化、精制等操作步驟進一步處理，得到輔酶Q10的產品。整個分離純化工藝就是去除發酵產物中的其他雜質，分離純化得到合格的輔酶Q10產品，同時通過優化生產工藝，降低生產成本。

由于輔酶Q10化學性質不穩定，將菌絲體進行干燥的過程將不可避免的使得部分產品分解，降低輔酶Q10的產量。同時，輔酶Q10的化學分子含有包括較長的不飽和碳鏈，分子極性小，屬于脂溶性物質，產業上通常使用的萃取溶劑為正己烷或者石油醚。正己烷或者石油醚作為輔酶Q10的萃取溶劑，具有如下優點：(1)化學性質穩定，萃取過程中不會發生化學變化，不會造成輔酶Q10的降解。(2)沸點適宜，萃取過程中不會快速蒸發，不會造成生產車間揮發溶劑的積累，在減壓條件下易于回收利用。(3)價格低廉，對輔酶Q10溶解度大，對其他雜質溶解度小，萃取后易于后續的分離純化，可以方便的獲得純度較高的產品。由于正己烷幾乎不溶于水，以濕菌絲體為原料使用正己烷直接進行萃取時，萃取溶劑與水混合效果不好，且萃取溶劑“穿透”被水膜包覆的菌絲體難度較大，造成萃取效率低，往往需要使用大量的萃取溶劑和長時間的打漿攪拌以使得輔酶Q10充分進入有機相。

發明內容