[發明專利]小鼠/人胚胎干細胞來源的類囊胚誘導培養液及小鼠/人的類囊胚誘導培養方法在審
| 申請號： | 202211671175.6 | 申請日： | 2022-12-26 |
| 公開（公告）號： | CN115927167A | 公開（公告）日： | 2023-04-07 |
| 發明（設計）人： | 吳寶江;包斯琴;王艷秋;李喜和 | 申請（專利權）人： | 內蒙古大學 |
| 主分類號： | C12N5/0735 | 分類號： | C12N5/0735;C12N5/073 |
| 代理公司： | 天津佳盟知識產權代理有限公司 12002 | 代理人： | 李淑惠 |
| 地址： | 010070 內蒙古*** | 國省代碼： | 內蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 小鼠 胚胎 干細胞 來源 囊胚 誘導 培養液 培養 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種小鼠/人胚胎干細胞來源的類囊胚誘導培養液，其特征在于：包括以下組分：每500ml類囊胚誘導培養液含CHIR99021的組成為：
余量由基礎培養液補充，
所述基礎培養液為基礎培養液DMEM/F12和基礎培養液Neurobasal，二者體積比為1:1。
2.根據權利1所述小鼠/人胚胎干細胞來源的類囊胚誘導培養液，其特征在于：每500ml類囊胚誘導培養液含CHIR99021的組成為：
3.一種利用權利要求1或2所述小鼠/人胚胎干細胞來源的類胚胎誘導培養方法，其特征在于：包括以下步驟：
(1)準備含PD0325901+CHIR99021+LIF的2i/L培養液條件下培養的小鼠胚胎干細胞和mTeSRTM1培養液條件下培養的人胚胎干細胞，分別在37℃、5％CO2濃度條件下培養。
(2)取步驟(1)準備的1×105個小鼠/人ESCs分別利用類囊胚誘導培養液，在37℃、5％CO2濃度條件下進行培養5-7天，分別獲得小鼠/人的含有囊胚三種類型細胞的混合細胞。
(3)取步驟(2)得到的混合細胞1×105個，在37℃、5％CO2濃度條件下利用類囊胚誘導培養液進行懸浮培養，每天更換誘導培養液，小鼠混合細胞在體外培養到3-4天，或人的混合細胞在體外培養到6-7天時開始形成小鼠和人的類囊胚結構。
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