[發明專利]一種親和試劑及其分離方法、檢測蛋白質中水楊酰化賴氨酸的方法

在審

• 申請號: 202211649216.1
• 申請日: 2022-12-21
• 公開（公告）號: CN116284347A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 戴倫治;龔艷秋
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: C07K16/06
• 分類號: C07K16/06;G01N33/68
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 覃蛟

1.一種分離的親和試劑，其特征在于，所述親和試劑特異性地結合肽中的水楊酰化賴氨酸。

2.根據權利要求1所述的分離的親和試劑，其特征在于，所述肽為具有賴氨酸水楊酰化位點的氨基酸組合或蛋白質；

優選地，所述氨基酸組合或蛋白質來源于真核生物；

優選地，所述氨基酸組合或蛋白質來源于脊椎動物、無脊椎動物或酵母；

優選地，所述脊椎動物為魚類、爬行類、鳥類、兩棲類或哺乳類動物；所述無脊椎動物為原生動物、腔腸動物、腐性動物、線性動物、環節動物、軟體動物、節肢動物、蠕蟲、棘皮動物或甲殼動物；

優選地，所述脊椎動物選自人、綿羊、牛、馬、驢、山羊、鹿、家禽、豬、貓、狗、猴、小鼠或大鼠；

所述無脊椎動物選自秀麗隱桿線蟲、果蠅或四膜蟲。

3.根據權利要求1或2所述的分離的親和試劑，其特征在于，所述肽選自：與SEQ?ID?NO：1-251任一項所示的氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列。

4.根據權利要求1或2所述的分離的親和試劑，其特征在于，所述肽在所述水楊酰化賴氨酸的N端和C端側上均包含至少1個氨基酸殘基。

5.根據權利要求1或2所述的分離的親和試劑，其特征在于，所述親和試劑為蛋白質；

優選地，所述親和試劑為抗體。

6.一種檢測蛋白質或其片段中的水楊酰化賴氨酸的方法，其特征在于，其包括如下步驟：

將所述蛋白質或其片段與權利要求1-5任一項所述的分離的親和試劑接觸，其中所述親和試劑特異性地結合到肽中的水楊酰化賴氨酸中，由此形成所述蛋白質或其片段與所述親和試劑的結合復合物；檢測所述結合復合物。

7.一種如權利要求1-5任一項所述的分離的親和試劑的分離方法，其特征在于，其包括如下步驟：

將蛋白庫暴露于包含水楊酰化賴氨酸的多肽中，由此來自于蛋白庫的樣本可特異性結合到水楊酰化賴氨酸中并與多肽形成結合復合物；從所述結合復合物中分離出蛋白質即為親和試劑。

8.一種如權利要求1-5任一項所述的分離的親和試劑的分離方法，其特征在于，其包括如下步驟：

用包含水楊酰化賴氨酸的肽免疫宿主，獲得抗體。

9.一種試劑或試劑盒，其特征在于，其包括權利要求1-5任一項所述的分離的親和試劑、權利要求7所述的分離方法分離獲得的親和試劑或權利要求8所述的分離方法獲得的親和試劑。

10.一種如權利要求1-5任一項所述的分離的親和試劑在制備試劑盒中的應用。

11.一種復合物，其特征在于，其包括：親和試劑、以及與所述親和試劑特異性結合的肽；所述親和試劑特異性地結合肽中的水楊酰化賴氨酸；

優選地，所述肽選自：與SEQ?ID?NO：1-251任一項所示的氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列；

優選地，所述親和試劑為蛋白質；

優選地，所述親和試劑為抗體。