[發明專利]用于猴痘病毒檢測的crRNA、核酸分子組合物、檢測體系及應用

在審

• 申請號: 202211628896.9
• 申請日: 2022-12-18
• 公開（公告）號: CN115820939A
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 杜丹;王瀟;湯有志;陸正榮;饒巧;王瑞
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/113;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 廈門律嘉知識產權代理事務所(普通合伙) 35225
• 代理人: 張輝

1.一種用于猴痘病毒檢測的crRNA，其特征在于：所述crRNA包括至少一組如SEQ ID NO1-6所示核苷酸序列。

2.如權利要求1所述的用于猴痘病毒檢測的crRNA，其特征在于：所述crRNA包括SEQ IDNO 1-6所示的核苷酸序列。

3.一種用于猴痘病毒檢測的核酸分子組合物，其特征在于：包括crRNA和RAA引物對，所述crRNA包括SEQ ID NO 1-6所示的核苷酸序列，所述RAA引物對包括至少一組以下的引物對：

(1)SEQ ID NO 7所示的上游引物序列和SEQ ID NO 8所示的下游引物序列；

(2)SEQ ID NO 9所示的含T7啟動子的上游引物序列和SEQ ID NO 10所示的下游引物序列；

(3)SEQ ID NO 11所示的上游引物序列和SEQ ID NO 12所示的下游引物序列；

(4)SEQ ID NO 13所示的含T7啟動子的上游引物序列和SEQ ID NO 14所示的下游引物序列；

(5)SEQ ID NO 15所示的上游引物序列和SEQ ID NO 16所示的下游引物序列；

(6)SEQ ID NO 17所示的含T7啟動子的上游引物序列和SEQ ID NO 18所示的下游引物序列。

4.如權利要求1或2所述的crRNA或權利要求3所述的核酸分子組合物在猴痘病毒檢測中的應用。

5.一種用于猴痘病毒檢測的CRISPR-Cas檢測體系，其特征在于：包括權利要求1或2所述的crRNA或者權利要求3所述的核酸分子組合物。

6.如權利要求要求5所述的用于猴痘病毒檢測的CRISPR-Cas檢測體系，其特征在于，所述的檢測體系為CRISPR-Cas12檢測體系或CRISPR-Cas13檢測體系或CRISPR-Cas12-Cas13雙通道檢測體系。

7.如權利要求要求6所述的用于猴痘病毒檢測的CRISPR-Cas檢測體系，其特征在于：還包括ssRNA報告分子或/和ssDNA報告分子，所述ssDNA報告分子的序列為5’-FAM-TTATT-BHQ1-3’或者其序列為5’-HEX-TTATT-BHQ1-3’；所述ssRNA報告分子的序列為5’-FAM-rUrUrUrUrU-BHQ1-3’。

8.如權利要求要求6所述的用于猴痘病毒檢測的CRISPR-Cas檢測體系，其特征在于：還包括ThT適配體或Mango III適配體；

所述ThT適配體，其序列為：5’-CGAGGCTATTAGGAGGTGGGATGC-3’；

所述Mango III適配體序列為：

5’-GGCACGUACGAAGGAAGGAUUGGUAUGUGGUAUAUUCGUACGUCC-3’。

9.如權利要求要求6所述的用于猴痘病毒檢測的CRISPR-Cas檢測體系，其特征在于：所述雙通道檢測包括猴痘病毒與猴痘病毒亞型、HIV病毒以及新冠病毒中任一種病毒的混合感染檢測，或者兩種猴痘病毒亞型的混合感染檢測。

10.一種用于猴痘病毒檢測試劑盒，其特征在于：所述檢測試劑盒包括權利要求1或2所述的crRNA，或者權利要求3所述的核酸分子組合物，或者權利要求5～9中任一項所述的CRISPR-Cas檢測體系。