[發明專利]人BUB1基因在制備抗腫瘤藥物中的用途

在審

• 申請號: 202211624482.9
• 申請日: 2022-12-16
• 公開（公告）號: CN116036121A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 陳加守;林佳珊;鄭進萍;邱德輝;謝翔峰
• 申請（專利權）人: 福州載基生物科技有限公司
• 主分類號: A61K31/713
• 分類號: A61K31/713;A61P35/00;C12N15/867;C12N15/113
• 代理公司: 深圳叁眾知識產權代理事務所(普通合伙) 44434
• 代理人: 杜立光

本發明屬于生物技術領域，具體涉及人BUB1基因在制備抗腫瘤藥物中的用途。本發明通過構建了人BUB1基因小分子干擾RNA、人BUB1基因干擾核酸構建體、人BUB1基因干擾慢病毒并公開了它們在制備抗腫瘤藥物的用途。提供shRNA或者包含該shRNA序列的核酸構建體、慢病毒能夠特異性抑制人基因的表達，尤其是慢病毒，能夠高效侵染靶細胞，高效率地抑制靶細胞中基因的表達，進而抑制腫瘤細胞的生長，促進腫瘤細胞凋亡，在腫瘤治療中具有重要意義。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及人BUB1基因在制備抗腫瘤藥物中的用途。

背景技術

膽管癌(CCA)屬于膽管上皮的高浸潤癌，死亡率高，因缺乏臨床癥，CCA在早期階段不容易診斷。CCA患者占肝膽癌的10-20％，近年來，CCA的發病率和死亡率正在迅速增加。目前，CCA尚無臨床治療方法，切除術是長期生存的唯一可能性。但CCA患者的5年生存率僅為10％，因此迫切需要確定CCA的新療法。

BUB1屬于絲氨酸/蘇氨酸激酶，在染色體分離、KT-MT相互作用和SAC功能方面中具有多種功能。

目前，未見關于BUB1基因在制備抗膽管癌藥物中的用途的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供人BUB1基因在制備抗腫瘤藥物中的應用。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：(論述獨權及從權技術方案)

抑制人BUB1基因的shRNA在制備抗腫瘤藥物中的用途。

抑制人BUB1基因的shRNA在制備抗膽管癌藥物中的用途。

以上用途中，所述shRNA序列為：

ShRNA1-F：5’-GATCCGTCCTTCAGATGCTTGAAGCCTTCAAGAGAGGCTTCAAGCATCTGAAGGACTTTTTG-3’；

ShRNA1-R：5’-AATTCAAAAAGTCCTTCAGATGCTTGAAGCCTCTCTTGAAGGCTTCAAGCATCTGAAGGACG-3’；

或

ShRNA2-F：5’-GATCCGATGCTTGAAGCCCACATGCATTCAAGAGATGCATGTGGGCTTCAAGCATCTTTTTG-3’；

ShRNA2-R：5’-AATTCAAAAAGATGCTTGAAGCCCACATGCATCTCTTGAATGCATGTGGGCTTCAAGCATCG-3’；

或

ShRNA3-F：5’-GATCCGCAGAGCTACAAGGGCAATGATTCAAGAGATCATTGCCCTTGTAGCTCTGCTTTTTG-3’；

ShRNA3-R：5’-AATTCAAAAAGCAGAGCTACAAGGGCAATGATCTCTTGAATCATTGCCCTTGTAGCTCTGCG-3’。

本發明還涉及抗膽管癌藥物的制備方法，包括以下步驟，從Genbank中調取人BUB1基因序列；預測多個shRNA靶點；

篩選shRNA靶點，在所選shRNA靶點序列中添加環狀序列，得到針對BUB1基因的有效的shRNA序列；

根據shRNA序列，設計并合成兩端含酶切位點的雙鏈DNA寡核苷酸序列；

慢病毒載體雙酶切后與雙鏈DNA雙鏈DNA寡核苷酸序列連接，構建表達BUB1基因shRNA序列的RNAi穿梭質粒；

將RNAi穿梭質粒轉化至感受態細胞，進行克隆；