[發(fā)明專(zhuān)利]人BUB1基因在制備抗腫瘤藥物中的用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211624482.9
• 申請(qǐng)日: 2022-12-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116036121A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳加守;林佳珊;鄭進(jìn)萍;邱德輝;謝翔峰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 福州載基生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61K31/713
• 分類(lèi)號(hào): A61K31/713;A61P35/00;C12N15/867;C12N15/113
• 代理公司: 深圳叁眾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44434
• 代理人: 杜立光

1.抑制人BUB1基因的shRNA在制備抗腫瘤藥物中的用途。

2.抑制人BUB1基因的shRNA在制備抗膽管癌藥物中的用途。

3.權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述用途，所述shRNA序列為：

ShRNA1-F：5’-GATCC?GTCCTTCAGATGCTTGAAGCC?TTCAAGAGA?GGCTTCAAGCATCTGAAGGACTTTTTG-3’；

ShRNA1-R：5’-AATTCAAAAA?GTCCTTCAGATGCTTGAAGCC?TCTCTTGAAGGCTTCAAGCATCTGAAGGAC?G-3’；

或

ShRNA2-F：5’-GATCC?GATGCTTGAAGCCCACATGCA?TTCAAGAGA?TGCATGTGGGCTTCAAGCATCTTTTTG-3’；

ShRNA2-R：5’-AATTCAAAAA?GATGCTTGAAGCCCACATGCA?TCTCTTGAATGCATGTGGGCTTCAAGCATC?G-3’；

或

ShRNA3-F：5’-GATCC?GCAGAGCTACAAGGGCAATGA?TTCAAGAGA?TCATTGCCCTTGTAGCTCTGCTTTTTG-3’；

ShRNA3-R：5’-AATTCAAAAA?GCAGAGCTACAAGGGCAATGA?TCTCTTGAATCATTGCCCTTGTAGCTCTGC?G-3’。

4.抗膽管癌藥物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟，從Genbank中調(diào)取人BUB1基因序列；預(yù)測(cè)多個(gè)shRNA靶點(diǎn)；

篩選shRNA靶點(diǎn)，在所選shRNA靶點(diǎn)序列中添加環(huán)狀序列，得到針對(duì)BUB1基因的有效的shRNA序列；

根據(jù)shRNA序列，設(shè)計(jì)并合成兩端含酶切位點(diǎn)的雙鏈DNA寡核苷酸序列；

慢病毒載體雙酶切后與雙鏈DNA雙鏈DNA寡核苷酸序列連接，構(gòu)建表達(dá)BUB1基因shRNA序列的RNAi穿梭質(zhì)粒；

將RNAi穿梭質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)胞，進(jìn)行克隆；

將RNAi穿梭質(zhì)粒和慢病毒包裝需要的輔助載體共轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞293T，產(chǎn)生重組慢病毒顆粒。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗膽管癌藥物的制備方法，其特征在于，所述慢病毒載體選自pLVX-shRNA2-Puro。