[發(fā)明專利]一種后生元及其制備方法和在抑菌產(chǎn)品中的應用

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• 申請日: 2022-12-16
• 公開（公告）號: CN116649578A
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發(fā)明（設計）人: 張艷華;汪海濤;余萍;閔祥博;矯艷平;宋佳
• 申請（專利權）人: 江西仁仁健康微生態(tài)科技有限公司
• 主分類號: A23L33/135
• 分類號: A23L33/135;A61K35/747;A23L5/20;C12N1/20;A61P31/04;A61P31/10;A61P15/02;C12R1/25;C12R1/01
• 代理公司: 沈陽杰克知識產(chǎn)權代理有限公司 21207
• 代理人: 楊華

1.一種后生元，其特征在于，所述后生元為植物乳植桿菌(Lactiplantibacillusplantarum)RH03147、植物乳植桿菌(Lactiplantibacillusplantarum)HCS03-001、羅伊氏粘液乳桿菌(Limosilactobacillusreuteri)HCS02-001三種乳酸菌的滅活菌體、菌體裂解物和代謝物的混合物。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種后生元，其特征在于，植物乳植桿菌(Lactiplantibacillus?plantarum)RH03147已于2022年09月23日保藏在“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”，保藏號為CGMCCNO.25775；植物乳植桿菌(Lactiplantibacillusplantarum)HCS03-001已于2018年08月14日保藏在“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”，保藏號為CGMCCNO.16258；羅伊氏粘液乳桿菌(Limosilactobacillusreuteri)HCS02-001已于2020年04月27日保藏在“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”，保藏號為CGMCCNO.19746。

3.權利要求1所述的一種后生元的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：將植物乳植桿菌RH03147、植物乳植桿菌HCS03-001、羅伊氏粘液乳桿菌HCS02-001菌株分別進行復蘇、活化、擴培，按比例接種于同一培養(yǎng)基進行發(fā)酵、分離、濃縮、滅菌得后生元液，經(jīng)噴霧干燥得后生元粉。

4.根據(jù)權利要求3所述的一種后生元的制備方法，其特征在于，將植物乳植桿菌RH03147、植物乳植桿菌HCS03-001、羅伊氏粘液乳桿菌HCS02-001分別按照以下操作進行菌種復蘇、活化和擴培；取存于低溫冰箱內(nèi)的菌種凍存管，立即放入37℃水浴鍋內(nèi)15～30s，至凍存管內(nèi)液體全部融化進行菌種復蘇；按照8～12％接種量，將復蘇好的菌種接種至培養(yǎng)基A中，37℃培養(yǎng)箱恒溫靜置培養(yǎng)16～18h獲得種子液；按照4～6％接種量，將種子液接種至培養(yǎng)基A中，37℃培養(yǎng)箱恒溫靜置培養(yǎng)16～18小時得培養(yǎng)液，4℃冰箱貯存?zhèn)溆谩?/p>

5.根據(jù)權利要求4所述的一種后生元的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵為二級發(fā)酵法，采用培養(yǎng)基為培養(yǎng)基B，以接種量2～6％將培養(yǎng)液接種到培養(yǎng)基B中，35℃攪動培養(yǎng)，攪拌速度60rpm，一級發(fā)酵時間16～18h，二級發(fā)酵時間36～40h，得發(fā)酵液。

6.根據(jù)權利要求5所述的一種后生元的制備方法，其特征在于，經(jīng)過濾所得濾液為無色至淺黃色透明液體；將其濃縮2倍，濃縮液狀態(tài)為淺黃色透明液體，均勻無雜質(zhì)；蒸煮殺菌30min獲得后生元液；所述干燥，是將后生原液添加6～12％的麥芽糊精，進行噴霧干燥，得到后生元粉。

7.根據(jù)權利要求6所述的一種后生元的制備方法，其特征在于，培養(yǎng)基A包括：酵母蛋白胨10.0～15.0g/L、葡萄糖20.0～30.0g/L、酵母浸出物5.0～9.0g/L、乙酸鈉5.0～9.0g/L、一水檸檬酸2.0～4.0g/L、磷酸二氫鉀2.0～4.0g/L、吐溫80?0.2～0.6g/L、硫酸鎂0.6～1.0g/L、余量為純化水；按照配方比例稱量、加熱溶解，115℃下滅菌30min，用1mol/L食品級NaOH溶液調(diào)培養(yǎng)基pH值至6.20-6.80。

8.根據(jù)權利要求7所述的一種后生元的制備方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基B包括：酵母蛋白胨3.0～7.0g/L、葡萄糖10～20.0g/L、酵母浸出物3.0～7.0g/L、乙酸鈉2.0～4.0g/L、一水檸檬酸2.0～4.0g/L、磷酸二氫鉀1.0～3.0g/L、吐溫80?0.2～0.6g/L、硫酸鎂0.6～1.0g/L、硫酸錳0.1～0.5g/L、余量為純化水；按照配方比例稱量、加熱溶解，115℃下滅菌30min，用1mol/L食品級NaOH溶液調(diào)培養(yǎng)基pH值至6.20-6.80。

9.權利要求1所述的一種后生元在制備抑菌產(chǎn)品中的應用。

10.根據(jù)權利要求9所述的應用，其特征在于，所述的抑菌是抑制陰道加德納菌、白色念珠菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌中的一種或二種以上。