[發(fā)明專利]藍光誘導釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)的構建在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202211547580.7 | 申請日： | 2022-12-05 |
| 公開（公告）號： | CN115960945A | 公開（公告）日： | 2023-04-14 |
| 發(fā)明（設計）人： | 周颯;李佳瑤;馬文建;宋國棟;牛家蕾;吳恒宇;吉南希 | 申請（專利權）人： | 天津科技大學 |
| 主分類號： | C12N15/81 | 分類號： | C12N15/81;C12N1/19;C12N15/113;C12N15/55;C12R1/865 |
| 代理公司： | 天津盛理知識產權代理有限公司 12209 | 代理人： | 韓曉梅 |
| 地址： | 300457 天津市濱*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 光誘導 釀酒 酵母 定點 dsb 系統(tǒng) 構建 | ||
1.一種藍光誘導釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)，步驟如下：
構建site-I-SceI-kanMX轉化盒，利用pC120-El222藍光誘導型啟動子進行誘導，通過PEG/LiAC法向釀酒酵母中進行轉化，即得到藍光誘導釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)。
2.根據(jù)權利要求1所述的藍光誘導釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)，其特征在于site-I-SceI-kanMX轉化盒時。I-sce1酶識別位點site序列為：SEQ?ID?NO.1。及藍光誘導的啟動子pC120-EL222核苷酸序列為SEQ?ID?NO.2。
3.根據(jù)權利要求1所述的藍光誘導釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)，其特征在于：所述誘導型啟動子為藍光誘導型啟動子pC120-EL222，其中包括：藍光調節(jié)啟動子pC120、藍光蛋白SV40-VP-El222以及啟動藍光蛋白的GAPpromoter和AOX1terminator。
4.根據(jù)權利要求1至3任一項所述的藍光誘導釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)，其特征在于：當在470nm藍光照射下，誘導I-sce1酶表達時，識別特異性位點進行酶切反應，發(fā)生定點DSB，此時，細胞發(fā)生修復應答。
5.如權利要求1至3任一項所述的釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)在作為研究藍光誘導釀酒酵母定點DSB系統(tǒng)的模型方面中的應用。
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