[發明專利]懸鉤子降糖降脂活性成分的分離、檢測方法及抗糖尿病產品中的應用

在審

• 申請號: 202211527138.8
• 申請日: 2022-11-30
• 公開（公告）號: CN115960146A
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發明（設計）人: 楊芳;張宗豪;靳秀花;韓永霞;童麗;孫勝男;李文淵
• 申請（專利權）人: 青海大學
• 主分類號: C07H17/065
• 分類號: C07H17/065;C07H17/07;C07H13/08;C07H1/08;C07D493/06;A61P5/50;A61P3/10;A61P3/06;A61K31/366;A61K31/7048;A61K31/7024;A23L33/105;G01N30/02;G01N
• 代理公司: 成都華風專利事務所(普通合伙) 51223
• 代理人: 杜朗宇

本發明屬于植物活性組分分離或檢測技術領域，具體涉及懸鉤子降糖降脂活性成分的分離、檢測方法及抗糖尿病產品中的應用，本發明所述分離方法包括以下內容：(1)將懸鉤子醇提物與聚酰胺混合；(2)將(1)中的混合樣品進樣至串聯的小型中壓色譜柱與聚酰胺中壓色譜柱中，分離得到五個組分Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5。本發明通過對得到的新化合物進行降糖降脂活性驗證，發現得到的懸鉤子單體化合物能夠有效改善胰島素抵抗所致的血糖、血脂升高，增強細胞對胰島素的敏感性；同時，本發明還在紫色懸鉤子提取物Fr.4中初步鑒定出了8種黃酮類化合物。

技術領域

本發明屬于植物活性組分分離技術領域，具體涉及懸鉤子降糖降脂活性成分的分離、檢測方法及抗糖尿病產品中的應用。

背景技術

懸鉤子(Rubus?corchorifolius?Linn.f.)，又名三月泡、四月泡、山拋子、刺葫蘆、山莓、饅頭菠、高腳菠、龍船泡、牛奶泡、樹莓、泡兒刺，在海拔300～1500m的向陽山坡、溪邊、山谷、荒地和灌木叢中生長。懸鉤子系薔薇科Rosaceae，薔薇亞科懸鉤子屬(Rubus，也稱樹莓屬)，山莓根、莖、葉、果實均可入藥，根性味微苦、辛、平，具有祛風除濕、活血化淤、解毒斂瘡的功效，主治風濕腰痛、痢疾、遺精、毒蛇咬傷、閉經痛經、濕疹、小兒疳積等癥。全株：補肝健胃、祛風止痛。

另外，懸鉤子中含有的豐富活性物質，仍有許多未被分離、鑒定，若能對懸鉤子中新的化學成分及其藥理作用進行更加深入、細微的研究與活性機制探討，則有望開發出更多可治療疾病且安全有效的天然植物來源藥物。

發明內容

本發明的目的在于提供懸鉤子降糖降脂活性成分的分離、檢測方法及抗糖尿病產品中的應用，分離得到的懸鉤子活性成分在抗糖尿病產品中的應用，拓寬了懸鉤子的應用范圍，并且為高血糖、高血脂患者提供了新的選擇。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

本發明提供了懸鉤子降糖降脂活性成分的分離方法，包括以下內容：

(1)將懸鉤子醇提物與聚酰胺混合；

(2)將(1)中的混合樣品進樣至串聯的小型中壓色譜柱與聚酰胺中壓色譜柱中，分離得到五個組分Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5；

其中，聚酰胺中壓色譜的色譜條件為：0～540min，0～100％甲醇梯度洗脫，540～700min，100％甲醇等度洗脫，流速35～45mL/min，檢測波長為205～215nm。

在本發明的一個實施例中，聚酰胺中壓色譜的色譜條件為：流速40mL/min，檢測波長為210nm。

在本發明的一個實施例中，將(1)中的混合樣品采用干法上樣至串聯的小型中壓色譜柱與聚酰胺中壓色譜柱中；

進一步地，五個組分出峰時間分別為：Fr1:10～70min，Fr2:71～160min，Fr3:161～238min，Fr4:239～410min，Fr5:411～700min。具體參見附圖。

在本發明的一個實施例中，所述懸鉤子醇提物是由懸鉤子莖葉經乙醇提取后經過濾、濃縮得到。

在本發明中，所述乙醇的體積分數為80～99％，進一步選自90～95％，例如可以選自80％、82％、84％、86％、88％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％等體積濃度的乙醇。

本發明所述的提取，可以選自但不限于加熱提取、滲濾提取、超聲提取、微波提取、浸漬提取、超臨界提取等等。

在提取以后，還包括其他的常規制備步驟，例如過濾、濃縮、離心、干燥、蒸發等等。

在本發明的一個實施例中，所述懸鉤子醇提物與聚酰胺混合后，需經干燥、研磨、過篩處理。