[發明專利]一種用于提取物證檢材上DNA的濾膜及其方法

在審

• 申請號: 202211464652.1
• 申請日: 2022-11-22
• 公開（公告）號: CN115820623A
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 劉超;蔡鳴;翟滇;李安;鄢榮;杜蔚安;陳雪云;鄭陽陽;韓亮;曾旭陽
• 申請（專利權）人: 珠海市祥臻生物科技有限公司;廣州市刑事科學技術研究所
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 謝曉華

本發明公開一種用于提取物證檢材上DNA的濾膜及其方法，包括以下步驟：S1：用第一磁珠懸浮液對濾膜進行浸泡，對浸泡有濾膜的第一磁珠懸浮液進行抽濾，直至濾膜上的液體被抽干，得到吸附有磁珠的濾膜；S2：利用緩沖液和第二磁珠懸浮液的混合液對物證檢材表面上進行沖脫處理后，獲得富集液，利用吸附有磁珠的濾膜對富集液進行抽濾，直至濾膜上富集液被抽干，得到富集有DNA和/或機體細胞的濾膜；S3：對富集有DNA和/或機體細胞的濾膜提取DNA。本發明解決了現有的提取方法無法準確提取體積大、耐水性好、異形、脫落細胞少且分布散的物證檢材上的DNA，從而實現針對多類型、多形態、不規則物證檢材上微量DNA準確提取的目的。

技術領域

本發明涉及DNA采集檢測技術領域，具體涉及一種用于提取物證檢材上DNA的濾膜及其方法。

背景技術

隨著DNA檢測技術的飛速發展，其在打擊量大、面廣且多發、易發的盜竊犯罪中，發揮著越來越重要的作用，成為了一個新的破案增長點。在許多區縣級公安機關，通過DNA認定犯罪嫌疑人的數量已經超過指紋認定的數量，盜竊案件提取的生物檢材數量也遠遠超過兇殺、傷害、強奸等人身傷亡案件提取的生物檢材數量之和。由于盜竊案件提取的生物檢材多為接觸類脫落細胞，DNA檢出率較低，容易發生污染，因此勘查人員能否在現場的物證檢材中提取到高質量的DNA，是決定DNA檢出認定能力的基礎。物證檢材的類型、發現提取部位和提取轉移方法等都是影響DNA檢驗結果的重要因素。

目前在DNA采集檢測技術領域中，針對不同物證檢材上留存的微量DNA進行提取的方式，主要有擦拭、粘取、剪切、刮取、負壓吸附以及震蕩沖洗等。但是在DNA提取的實際工作中，針對一部分體積大、耐水性好或外表形狀為異形等的物證，僅采用常規的擦拭、粘取或者刮取等轉移性的提取方法，難以獲得準確的DNA檢驗結果。

另外，犯罪嫌疑人遺留在犯罪現場的帽子、口罩、衣服、手套、運動鞋以及襪子，因其含有機體的脫落細胞以及游離DNA，逐漸成為常規物證檢材。但是這類物證檢材因為含有的脫落細胞和游離DNA少，并且分布較散，給DNA的提取帶來了一定的困難。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明提供一種用于提取物證檢材上DNA的濾膜及其方法，解決現有的DNA提取方法無法準確提取體積大、耐水性好、異形、脫落細胞和游離DNA少且分布散的物證檢材上的DNA，從而實現針對多類型、多形態、不規則物證檢材上微量DNA準確提取的目的。

為解決上述問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種用于提取物證檢材上DNA的濾膜，所述濾膜的孔徑為0.45-1.5um，且表面附著有粒徑為1-3um的磁珠顆粒。

一種用于提取物證檢材上DNA的方法，包括以下步驟：

步驟S1：用第一磁珠懸浮液對濾膜進行浸泡，對浸泡有濾膜的第一磁珠懸浮液進行抽濾，直至濾膜上液體被抽干，得到吸附有磁珠的濾膜；

步驟S2：利用緩沖液和第二磁珠懸浮液的混合液對物證檢材表面上的DNA和/或機體細胞進行沖脫處理后，獲得富集液，利用吸附有磁珠的濾膜對所述富集液進行抽濾，直至濾膜上的富集液被抽干，得到富集有DNA和/或機體細胞的濾膜；

步驟S3：對所述富集有DNA和/或機體細胞的濾膜進行DNA提取。

作為本發明優選的實施方式，所述第一磁珠懸浮液為硅微粉、聚丙烯酸鈉以及純水的混合物；所述第二磁珠懸浮液為混合粉末溶液、硅微粉以及純水的混合物；

其中，所述混合粉末溶液為將乙二胺四乙酸、氯化鈉、胍鹽以及乙酸鈉加入異丙醇溶液混合均勻而制成。

作為本發明優選的實施方式，所述步驟S1中的浸泡具體為：用第一磁珠懸浮液對濾膜浸泡1-10min。

作為本發明優選的實施方式，按質量比計，所述混合液中緩沖液與第二磁珠懸浮液的比例為10～20：1。