[發明專利]一種用于提取物證檢材上DNA的濾膜及其方法

在審

• 申請號: 202211464652.1
• 申請日: 2022-11-22
• 公開（公告）號: CN115820623A
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 劉超;蔡鳴;翟滇;李安;鄢榮;杜蔚安;陳雪云;鄭陽陽;韓亮;曾旭陽
• 申請（專利權）人: 珠海市祥臻生物科技有限公司;廣州市刑事科學技術研究所
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 謝曉華

1.一種用于提取物證檢材上DNA的濾膜，其特征在于，所述濾膜的孔徑為0.45-1.5um，且表面附著有粒徑為1-3um的磁珠顆粒。

2.一種用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟S1：用第一磁珠懸浮液對濾膜進行浸泡，對浸泡有濾膜的第一磁珠懸浮液進行抽濾，直至濾膜上的液體被抽干，得到吸附有磁珠的濾膜；

步驟S2：利用緩沖液和第二磁珠懸浮液的混合液對物證檢材表面上的DNA和/或機體細胞進行沖脫處理后，獲得富集液，利用吸附有磁珠的濾膜對所述富集液進行抽濾，直至濾膜上的富集液被抽干，得到富集有DNA和/或機體細胞的濾膜；

步驟S3：對所述富集有DNA和/或機體細胞的濾膜進行DNA提取。

3.根據權利要求2所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，所述第一磁珠懸浮液為硅微粉、聚丙烯酸鈉以及純水的混合物；所述第二磁珠懸浮液為混合粉末溶液、硅微粉以及純水的混合物；

其中，所述混合粉末溶液為將乙二胺四乙酸、氯化鈉、胍鹽以及乙酸鈉加入異丙醇溶液混合均勻而制成。

4.根據權利要求3所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，所述步驟S1中的浸泡具體為：用第一磁珠懸浮液對濾膜浸泡1-10min。

5.根據權利要求3所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，按質量比計，所述混合液中緩沖液與第二磁珠懸浮液的比例為10～20：1。

6.根據權利要求2所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，所述濾膜的孔徑為0.45-1.5um。

7.根據權利要求2所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，所述步驟S1和步驟S2中的抽濾具體為：真空負壓抽濾，真空負壓值為-60Kpa至-95Kpa。

8.根據權利要求2所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，所述沖脫處理具體為：對物證檢材表面進行沖淋和/或定位浸泡部分或全部的物證檢材表面。

9.根據權利要求5所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，所述緩沖液的制備具體為：將乙二胺四乙酸、氯化鈉、高氯酸鹽以及乙酸鈉加入異丙醇溶液，混合均勻后，再利用乙酸將PH值至6-7；

其中，按質量百分比計，所述異丙醇溶液的濃度為10％-30％，按毫摩爾每升計，所述乙二胺四乙酸的含量為1-100，所述氯化鈉的含量為0.5-1，所述高氯酸鹽的含量為0.5-2，所述乙酸鈉的含量為100-200。

10.根據權利要求5所述的用于提取物證檢材上DNA的方法，其特征在于，所述緩沖液的制備具體為：將乙二胺四乙酸、氯化鈉、胍鹽以及乙酸鈉加入異丙醇溶液，混合均勻后，再利用乙酸將PH值調整至6-7；

其中，按質量百分比計，所述異丙醇溶液的濃度為10％-30％，按毫摩爾每升計，所述乙二胺四乙酸的含量為1-100，所述氯化鈉的含量為0.5-1，所述胍鹽的含量為0.5-2L，所述乙酸鈉的含量為100-200。