[發明專利]一種甘薯脫毒原原種苗的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 202211411320.7
• 申請日: 2022-11-11
• 公開（公告）號: CN115644063A
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 隋炯明;馬濤;于愷悅;郭家宇;劉書妍;林順鈺;朱虹;趙春梅;鄧秀峰;武秀玲
• 申請（專利權）人: 青島農業大學;萊州市金海種業有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G2/10
• 代理公司: 山東三邦知識產權代理事務所(普通合伙) 37308
• 代理人: 肖太升

1.一種甘薯脫毒原原種苗的快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)莖尖的剝取和培育

剝取0.2～0.3mm帶葉原基的甘薯莖尖，接種至含有植物生長激素的培養基中，保持溫度25～27℃，每日10～14h光照，光照強度2000～3000lx，誘導不定芽的分化；當再生小苗生長至2cm以上時，從其基部切下，轉移至不含有植物生長激素的培養基中，保持溫度25～27℃，每日10～14h光照，光照強度2000～3000lx，培養獲得試管苗；

(2)試管苗的莖段剪切

將試管苗洗凈，移栽至育苗盒的基質土中，蓋緊育苗盒并關閉通氣孔，保持溫度20～30℃，濕度40～60％，光照強度500～2000lx，進行2～3d的緩苗；當試管苗成活后，打開通氣孔，待生長7～10d后，剪取帶有頂芽的莖段；

(3)脫毒苗的莖段繁育

將剪切下來的莖段，扦插至育苗盒的基質土中，蓋緊育苗盒并關閉通氣孔，保持溫度20～30℃，濕度40～60％，光照強度500～2000lx，進行2～3d的緩苗；當頂芽莖段成活后，打開通氣孔，待生長7～10d后，獲得完整脫毒苗，剪取帶有頂芽的莖段；

(4)脫毒原原種苗快繁

將剪切下來的莖段重復步驟(3)，保持脫毒原原種苗的向前繁育；同時，在整個繁育過程中，被剪掉頂芽的脫毒苗能在短時間長出大量腋芽，待生長7～10d后，各腋芽長大，剪取帶有頂芽的莖段，并重復步驟(3)的莖段繁育過程，從而使得脫毒原原種苗得到快速大量繁殖。

2.根據權利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，所述帶葉原基的甘薯莖尖是從2～3cm帶幼葉的莖段中剝取的。

3.根據權利要求2所述的繁殖方法，其特征在于，在體視解剖鏡下剝取甘薯莖尖。

4.根據權利要求2所述的繁殖方法，其特征在于，所述2～3cm帶幼葉的莖段是從10cm以上的甘薯芽苗的頂端獲取的；在進行莖尖的剝取前，需剪去莖段上肉眼可見的葉片，然后對莖段進行沖洗消毒。

5.根據權利要求4所述的繁殖方法，其特征在于，所述沖洗消毒為：采用清水沖洗，然后用70％酒精浸泡15s，再用質量份數為2％的次氯酸鈉溶液浸泡6min進行表面消毒，最后用無菌水漂洗4遍。

6.根據權利要求4所述的繁殖方法，其特征在于，所述10cm以上的甘薯芽苗，由如下方法培養獲得：

選取無蟲蛀、無損傷的薯塊，在太陽底下暴曬2～3d；將薯塊用清水洗凈，放入沙子中，薯塊上覆蓋厚度為1～2cm的沙子，然后置于28℃培養箱中催芽；在出芽前，避光培養1周；在出芽后，每日進行13h光照，光照強度為1500lx，直至芽苗長至10cm以上。

7.根據權利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，所述含有植物生長激素的培養基選自：添加有0.1～0.2mg/L NAA和1～2mg/L BAP的MS培養基。

8.根據權利要求7所述的繁殖方法，其特征在于，所述NAA的濃度為0.2mg/L，所述BAP的濃度為2mg/L。

9.根據權利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，所述不含有植物生長激素的培養基選自MS培養基。

10.根據權利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，所述剪取的帶有頂芽的莖段，其長度在1cm以上。