[發(fā)明專利]一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法

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• 申請日: 2022-11-08
• 公開（公告）號: CN116124961A
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李曦;侯雪;宋君;仲伶俐;雷欣宇;趙珊;黃世群;鄭幸果;秦琳;靳可婷
• 申請（專利權(quán)）人: 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 牟森

1.一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1，待測配方食品前處理：取待測配方食品，在避光的條件下，依次進(jìn)行皂化、萃取分離、蒸發(fā)提純、溶解及微孔濾膜過濾，后得到待測配方食品檢測液；

步驟2，待測配方食品檢測液測定：采用超高效液相色譜儀，色譜柱為C18和PFP串聯(lián)色譜柱，以甲醇-水為流動相，紫外檢測器和熒光檢測器串聯(lián)，柱溫為21±0.2℃，流速為0.32±0.02mL/min，定性或/和定量同時檢測維生素A、維生素D2、維生素D3、維生素α-VE、維生素β-VE、維生素γ-VE和維生素δ-VE。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述步驟1中待測配方食品前處理的具體步驟為：

步驟1-1，皂化：稱取待測配方食品置于棕色三角瓶中，加入抗壞血酸、BHT乙醇溶液，超聲使試樣分散均勻，加入氫氧化鉀水溶液，轉(zhuǎn)移至磁力攪拌水浴鍋，80±2℃下回流皂化30min，皂化完全后，得到皂化后的待測配方食品；

步驟1-2，萃取分離：迅速冷卻皂化后的待測配方食品進(jìn)行萃取分離，加入相當(dāng)于皂化后的待測配方食品體積的0.1-10倍的石油醚和乙醚混合物，進(jìn)行攪拌，靜置分層，分離下層水相，重復(fù)萃取分離至少兩次，合并得到的有機(jī)層；

步驟1-3，蒸發(fā)提純：洗滌有機(jī)層至中性，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉過濾至棕色三角瓶中，40±3℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，待瓶中有機(jī)層剩余2±1mL時用氮吹儀吹干得到殘留物；

步驟1-4，溶解及微孔濾膜過濾：殘留物用2mL甲醇溶解，再經(jīng)微孔濾膜過濾得到待測配方食品檢測液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述步驟1-1中待測配方食品、抗壞血酸、BHT及氫氧化鉀的質(zhì)量比為(1～5)：(0.8～1.2)：(1.2～2)：(5～10)；步驟1-2使用磁力攪拌萃取；步驟1-2中所述石油醚和乙醚混合物按照石油醚和乙醚體積比為1：1進(jìn)行混合。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述步驟2中色譜柱為C18和PFP串聯(lián)色譜柱，其中色譜柱C18的規(guī)格為2.1×150mm，1.7μm，色譜柱PFP的規(guī)格為4.6×150mm，2.7μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述步驟2中紫外檢測器的檢測波長為325nm和265nm，熒光檢測器的激發(fā)波長為294nm，發(fā)射波長為328nm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述步驟2中超高效液相色譜儀的一次進(jìn)樣量為5-15μL。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述步驟2中超高效液相色譜儀的一次進(jìn)樣量為10μL。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述的配方食品包括配方乳粉、配方豆奶粉、配方玉米粉、配方米粉、配方面條中的任一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，還包括步驟3，計算：采用外標(biāo)法通過標(biāo)準(zhǔn)曲線分別計算維生素A、維生素D2、維生素D3、維生素α-VE、維生素β-VE、維生素γ-VE和δ-VE的濃度。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種配方食品中同時測定維生素ADE含量的方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法為：用甲醇將維生素A、維生素D2、維生素D3、維生素α-VE、維生素β-VE、維生素γ-VE、和維生素δ-VE標(biāo)準(zhǔn)品配制成標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，使?jié)舛确謩e為維生素A：0.02μg/mL、0.1μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL；維生素D2和維生素D3均為：0.02μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL；維生素α-VE、維生素β-VE、維生素γ-VE和維生素δ-VE均為：0.02μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL；將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液分別注入超高效液相色譜儀中，測定相應(yīng)的峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)測定液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得到相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。