[發(fā)明專利]一種雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202211385628.9 | 申請日： | 2022-11-07 |
| 公開（公告）號： | CN115894930A | 公開（公告）日： | 2023-04-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 賈瓊;許伊童;馬玖彤;鄭海嬌 | 申請（專利權(quán)）人： | 吉林大學(xué) |
| 主分類號： | C08G77/26 | 分類號： | C08G77/26;C08G77/06;C08J9/28;C08L83/08;B01J20/26;B01J20/30;B01D15/08;G01N21/65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 雙重 主客 錨定 印跡 聚合物 制備 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟（1）、選擇目標(biāo)蛋白的C端和N端表位的氨基酸序列并對其進(jìn)行修飾；
步驟（2）、Au納米星和Ag納米粒子的合成；
步驟（3）、基底材料的選擇及β－環(huán)糊精功能化；
步驟（4）、偶氮苯修飾的表位模板在基底材料上的錨定；
步驟（5）、定向表面印跡；
步驟（6）、偶氮苯修飾的表位模板的去除，得到分子印跡聚合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，在步驟（1）中，對于目標(biāo)蛋白C端的修飾，先引入賴氨酸，再利用賴氨酸上的氨基與4-（苯基偶氮）苯甲酸進(jìn)行反應(yīng)，得到偶氮苯修飾的C端表位；
對于目標(biāo)蛋白N端的修飾，其末端存在可反應(yīng)的氨基，直接與4-（苯基偶氮）苯甲酸反應(yīng)，得到偶氮苯修飾N端表位。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，在步驟（2）中，配置0.1molHEPES水溶液，通過滴加1molNaOH溶液將pH值調(diào)節(jié)至7.4，將超純水加入到2mLHEPES中，再加入40μL1%HAuCl4，混合物在不攪拌的情況下反應(yīng)1h，得到藍(lán)色AuNSs溶液；將含有0.0090g?AgNO3的50?mL超純水加熱，沸騰后加入1?mL?1%檸檬酸三鈉溶液，煮沸1h后，將該溶液冷卻得到AgNPs。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，在步驟（3）中，C端表位選擇β－環(huán)糊精功能化的玻璃基底，N端表位選擇β－環(huán)糊精和拉曼報告分子功能化的Ag納米粒子基底，β－環(huán)糊精功能化玻璃基底的具體合成步驟如下：
步驟（11）、制作氨基功能化的玻璃基底，將玻璃基底切成若干等分，并在其表面刻上大小相等的小圓圈，用食人魚溶液和超純水依次對玻璃基底進(jìn)行沖洗；
步驟（12）、將玻璃基底浸入4%APTES的乙醇溶液中12h，并用乙醇清洗干凈后干燥；
步驟（13）、將步驟（12）得到的玻璃基底浸泡在10mLAuNSs溶液中過夜，并用超純水對其進(jìn)行沖洗；
步驟（14）、用含有SH-β－環(huán)糊精的水溶液浸泡玻璃基底，超純水沖洗后得到β－環(huán)糊精功能化的玻璃基底。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，β－環(huán)糊精和拉曼報告分子功能化的Ag納米粒子基底的合成步驟如下：
步驟（21）、將含有0.0090g?AgNO3的50?mL超純水加熱，沸騰后加入1?mL?1%檸檬酸三鈉溶液，煮沸1h后，將該溶液冷卻得到AgNPs；
步驟（22）、在AgNPs溶液里添加含拉曼報告分子的乙醇溶液，進(jìn)行混合攪拌后，加入β－環(huán)糊精水溶液攪拌混合并過夜，得到β－環(huán)糊精和拉曼報告分子功能化的銀納米粒子基底。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，在步驟（4）中，將β－環(huán)糊精功能化修飾的基底材料浸入含有偶氮苯修飾的表位模板的緩沖液中，調(diào)節(jié)pH值和孵育溫度，對其進(jìn)行孵育，使得偶氮苯修飾的表位模板錨定在β－環(huán)糊精功能化修飾的基底材料上。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，在步驟（5）中，在已經(jīng)錨定表位模板的基底材料加入到含有水、氨水及硅烷化試劑功能單體的乙醇溶液中進(jìn)行印跡。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙重主客體錨定表位印跡聚合物的制備方法，其特征在于，在步驟（6）中，將完成印跡的基底材料，在365nm光的照射下浸泡入洗脫液中并進(jìn)行反應(yīng)，表位模板清除后，得到分子印跡聚合物。
9.如權(quán)利要求1所述方法制備的雙重主客體錨定表位印跡聚合物在小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行診斷的應(yīng)用。
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