[發明專利]一種檢測ApoE基因型的產品及方法

在審

• 申請號: 202211382462.5
• 申請日: 2022-11-07
• 公開（公告）號: CN115820828A
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 潘偉;何震宇;趙自厚;尹明星;黃振輝
• 申請（專利權）人: 廣東藥科大學
• 主分類號: C12Q1/6881
• 分類號: C12Q1/6881;C12N15/11;C12Q1/6848
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 林德強

1.用于ApoE基因型分型的引物，其特征在于，所述引物如SEQ ID NO：1～4所示。

2.權利要求1所述的引物在制備ApoE基因型分型檢測產品中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述ApoE基因型分型檢測產品包括檢測試劑、檢測試劑盒、檢測芯片。

4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述ApoE基因型分型檢測產品中還包括HhaI限制性內切酶。

5.一種ApoE基因型分型方法，包括如下步驟：

(1)取待測細胞，使用SEQ ID NO：1～4所示引物進行巢式PCR擴增，得到巢式PCR擴增產物；

(2)對巢式PCR擴增產物進行酶切處理，得到酶切產物；

(3)對酶切產物進行瓊脂糖凝膠電泳，根據條帶組成進行分型。

6.根據權利要求5所述的ApoE基因型分型方法，其特征在于，所述細胞包括口腔上皮細胞。

7.根據權利要求5所述的ApoE基因型分型方法，其特征在于，所述巢式PCR擴增采用2輪PCR擴增，第1輪PCR擴增使用SEQ ID NO：1～2所示引物，第2輪PCR擴增使用SEQ ID NO：3～4所示引物。

8.根據權利要求7所述的ApoE基因型分型方法，其特征在于，所述第1輪PCR擴增產物大小為570～600bp，第2輪PCR擴增產物大小為211～231bp。

9.根據權利要求5所述的ApoE基因型分型方法，其特征在于，所述酶切使用HhaI限制性內切酶。

10.根據權利要求5所述的ApoE基因型分型方法，其特征在于，所述分型的標準為：若條帶組成為112bp、91bp和18bp，則基因型為突變型純合子E2/E2；若條帶組成為112bp、48bp、43bp和18bp，則基因型為突變型純合子E3/E3；若條帶組成為72bp、48bp、43bp、40bp和18bp，則基因型為突變型純合子E4/E4；若條帶組成為112bp、91bp、48bp、43bp和18bp，則基因型為雜合子E2/E3；若條帶組成為112bp、72bp、48bp、43bp、40bp和18bp，則基因型為雜合子E3/E4；若條帶組成為112bp、91bp、72bp、48bp、43bp、40bp和18bp，則基因型為雜合子E2/E4。