[發明專利]一種同時富集和分離血漿中2種抗癲癇藥物及其代謝產物的分子印跡膜的制備方法和應用

在審

• 申請號: 202211362245.X
• 申請日: 2022-11-02
• 公開（公告）號: CN115739041A
• 公開（公告）日: 2023-03-07
• 發明（設計）人: 杜巖;湯道權;尤宇欣;蔣函
• 申請（專利權）人: 徐州醫科大學
• 主分類號: B01J20/26
• 分類號: B01J20/26;B01J20/28;B01J20/30;G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤;王海云

本發明涉及一種同時富集和分離血漿中2種抗癲癇藥物及其代謝產物的分子印跡膜的制備方法和應用，以聚偏二氟乙烯膜為基膜，奧卡西平為單一模板分子，甲基丙烯酸甲酯為功能單體，制備方法簡單，在反應過程中優化參數條件，在交聯劑、引發劑和致孔劑的作用下制備的分子印跡膜，可以同時實現血漿中卡馬西平、奧卡西平、10,11?環氧卡馬西平和10,11?二氫?10?羥基卡馬西平的特異性識別富集與分離，具有良好的吸附性能，并可多次重復使用，再生能力強，減小生物樣本基質的干擾、提高復雜樣本前處理效率及微量目標物的提取率，實現在血藥濃度測定中的應用。

技術領域

本發明屬于分子印跡膜技術領域，具體涉及一種同時富集和分離血漿中2種抗癲癇藥物及其代謝產物的分子印跡膜的制備方法和應用，其中，2種抗癲癇藥物及其代謝物分別為卡馬西平、奧卡西平、10，11-環氧卡馬西平及10,11-二氫-10-羥基卡馬西平。

背景技術

癲癇(epilepsy)是由各種原因引起的腦組織局部神經元異常高頻放電，并向周圍組織擴散，導致大腦功能短暫失調的綜合征，是一種表現為反復癲癇發作的慢性腦部疾病，影響著全球約7000多萬人口，每年約有12.5萬例癲癇患者死亡。在我國，癲癇已經成為神經科僅次于頭痛的第二大神經系統疾病，給患者和家屬帶來極大的痛苦。藥物治療仍然是當前控制癲癇發作的首選。卡馬西平(CBZ)作為第一代抗癲癇藥物，是治療癲癇全面性強直-陣攣發作、部分性發作和繼發性全身發作的首選藥物之一，具有個體差異大、非線性藥代動力學、毒性大等明顯缺點。CBZ口服后，主要經肝臟代謝為活性代謝產物10,11-環氧卡馬西平(CBZE)，代謝物的水平與CBZ療效與毒副作用顯著相關。奧卡西平(OXC)是在CBZ的化學結構基礎上改造后的第二代抗癲癇藥物，主要經肝臟代謝為活性代謝產物10,11-二氫-10-羥基卡馬西平(MHD)。OXC雖克服了卡馬西平的缺點，但受基因多態性影響，其在個體間的血藥濃度差異仍然較大。因此，建立集快速、簡便、準確于一體的CBZ及其結構類似物的靶向富集與檢測的臨床血藥濃度監測方法，對臨床醫生實現癲癇病的精準藥物治療，具有重要的學術和應用價值

據文獻報道，目前檢測血漿中CBZ、OXC及其活性代謝產物的常用方法有常用方法有液相色譜法、氣相色譜法、液相色譜-質譜聯用、氣相色譜-質譜聯用等。但生物基質對色譜分離系統易產生污染和損害、對采用ESI源的液相色譜-質譜檢測易導致基質效應，因此，樣品處理成為該類分析方法的重要關注點。樣品前處理常用的方法有蛋白沉淀、液液萃取、固相萃取、固相微萃取等，但上述方法存在提取效率低、基質處理復雜、實驗過程耗時長、基質對測定結果干擾大、實驗操作對分析人員的技術要求高等缺點。

分子印跡膜(MIPM)將分子印跡聚合物的特異性識別與膜吸附功能相結合，具有高滲透性、高選擇性、比表面積大、具有較快吸附速度的鮮明特點，在各種基質中微量樣品的富集與分離廣泛應用。在分子印跡膜制備過程中，如果以每個分析對象為模板分子，分別制備適應于不同化合物樣品處理的MIPM，無疑將增加樣品處理的繁瑣程度和分析的難度。因此，需要構建一種單一模板的分子印跡膜制備方法，制備能夠同時適應于血液中CBZ、OXC及其活性代謝產物(CBZE和MHD)靶向富集與分離的分子印跡材料。

發明內容

本發明的目的是在現有技術的基礎上，提供一種同時富集和分離血漿中2種抗癲癇藥物及其代謝產物的分子印跡膜的制備方法，以聚偏二氟乙烯膜為基膜，奧卡西平為模板分子制備的分子印跡膜，可以同時實現血漿中卡馬西平、奧卡西平、10,11-環氧卡馬西平和10,11-二氫-10-羥基卡馬西平的特異性識別富集與分離，具有良好的吸附性能，并可多次重復使用，再生能力強，減小生物樣本基質的干擾、提高復雜樣本前處理效率及微量目標物的提取率，實現在血藥濃度測定中的應用，以幫助臨床醫生實現癲癇病患者的精準藥物治療。

本發明的另一目的是提供一種上述分子印跡膜在同時富集和分離血漿中卡馬西平、奧卡西平、10,11-環氧卡馬西平和10,11-二氫-10-羥基卡馬西平中的應用，并結合HPLC進行分離分析，為臨床上血藥濃度測定提供專屬、簡便、快捷、精準的分析方法。

本發明的技術方案如下：