[發(fā)明專利]一種包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質(zhì)酸水凝膠的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211348348.0
• 申請日: 2022-10-31
• 公開（公告）號: CN115612124A
• 公開（公告）日: 2023-01-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任穎;徐子棠;郭舒琪;封昊天;袁長永;王鵬來
• 申請（專利權(quán)）人: 徐州醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C08J3/075
• 分類號: C08J3/075;C08L5/08;C08L89/00;C08K3/26;A61L27/26;A61L27/50;A61L27/52;A61L27/54
• 代理公司: 南京擎天知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32465
• 代理人: 涂春春

本發(fā)明公開了一種包含BMP2模擬肽和SDF?1的可注射透明質(zhì)酸水凝膠的制備方法，其特征在于，1）制備包含BMP2模擬肽的透明質(zhì)酸水凝膠前體溶液；2)制備復(fù)合SDF?1的絲素蛋白微球；2?1）制備絲素蛋白微球：2?2）將SDF?1與絲素蛋白微球在溶液中通過正負(fù)電吸附原理進(jìn)行復(fù)合形成復(fù)合SDF?1的絲素蛋白微球；3）將復(fù)合SDF?1的絲素蛋白微球與透明質(zhì)酸水凝膠前體溶液混合，常溫即可形成包含BMP2模擬肽和SDF?1的可注射透明質(zhì)酸水凝膠。本發(fā)明以透明質(zhì)酸為水凝膠的主體，引入絲素微球復(fù)合SDF?1，同時(shí)包載BMP2模擬肽，解決了SDF?1、BMP2因子的體內(nèi)突釋及BMP2因子免疫原性問題，成功制備BMP2模擬肽修飾及包載復(fù)合SDF?1絲素蛋白微球的可注射透明質(zhì)酸水凝膠，為該生物材料體內(nèi)促進(jìn)骨組織再生奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及材料領(lǐng)域，具體涉及一種包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質(zhì)酸水凝膠的制備方法。

背景技術(shù)

水凝膠是通過化學(xué)鍵、氫鍵、范德華力或物理纏結(jié)等方式交聯(lián)的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的特殊軟濕性材料，可以在水或生物體液中溶脹但不溶解，兼具有固態(tài)和液態(tài)兩種性質(zhì)。這一特性使其廣泛應(yīng)用于組織工程、藥物載體等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。由于水凝膠三維空間網(wǎng)路結(jié)構(gòu)和天然的細(xì)胞外基質(zhì)相似，因此，水凝膠材料可以為細(xì)胞粘附、增殖、生長提供支撐作用和代謝空間，水凝膠吸水膨脹的特性以及對小分子的滲透擴(kuò)散使其具有良好的生物相容性，且水凝膠良好的柔韌性和高彈性可以極大的減少對細(xì)胞的損傷，因此可廣泛與用于組織工程修復(fù)等領(lǐng)域。

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(SDF-1)是一種超細(xì)胞衍生因子，可以招募干細(xì)胞，引起干細(xì)胞的募集行為，同時(shí)研究表明SDF-1可在牙周膜干細(xì)胞膜表面分泌，并且和血管內(nèi)皮生長因子及成纖維細(xì)胞生長因子2(FGF2)類似具有支持和促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞分化的潛能。此外，SDF-1參與調(diào)節(jié)血管生成，部分通過募集內(nèi)皮祖細(xì)胞以及引導(dǎo)干細(xì)胞的運(yùn)輸在胚胎發(fā)生、發(fā)育和組織再生期間發(fā)揮重要作用，并可通過激活脂磷酸激酶(P13K)將牙周膜干細(xì)胞遷移到牙周組織缺損部位，同時(shí)能對牙周組織炎癥進(jìn)行調(diào)控，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。目前對SDF-1因子的使用集中于單獨(dú)注射或?qū)⑸锊牧辖萦赟DF-1稀釋液中，不利于SDF-1因子的緩控釋及持續(xù)作用。

BMP2(骨形態(tài)發(fā)生蛋白2)模擬肽(序列：KIPKASSVPTELSAISTLYL)具有BMP2相似的生物學(xué)作用，可以促進(jìn)干細(xì)胞成骨，但是目前大劑量BMP2反而不利于干細(xì)胞的成骨分化。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質(zhì)酸水凝膠的制備方法，制備方法簡單，解決了SDF-1、BMP2因子單獨(dú)使用所涉及的體內(nèi)突釋問題。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：一種包含BMP2和SDF-1的可注射透明質(zhì)酸水凝膠的制備方法，包括如下步驟：

1)制備包含BMP2模擬肽的透明質(zhì)酸水凝膠前體溶液

1-1)制備己二酸二酰肼修飾的透明質(zhì)酸HA-ADH；

1-2)制備氧化透明質(zhì)酸HA-CHO；

1-3)上述所制備的產(chǎn)物HA-ADH和HA-CHO分別用BMP2模擬肽溶液溶解形成包含BMP2模擬肽的HA-ADH溶液和包含BMP2模擬肽的HA-CHO溶液，兩者即為包含BMP2模擬肽的的透明質(zhì)酸水凝膠前體溶液；

2)制備復(fù)合SDF-1的絲素蛋白微球

2-1)制備絲素蛋白微球：以Ca₂CO₃作為絲素蛋白微球的核心，絲素蛋白包覆于Ca₂CO₃外；

2-2)將SDF-1與絲素蛋白微球在溶液中通過正負(fù)電吸附原理進(jìn)行復(fù)合形成復(fù)合SDF-1的絲素蛋白微球；