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[發明專利]一種包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質酸水凝膠的制備方法在審

專利信息
申請號: 202211348348.0 申請日: 2022-10-31
公開(公告)號: CN115612124A 公開(公告)日: 2023-01-17
發明(設計)人: 任穎;徐子棠;郭舒琪;封昊天;袁長永;王鵬來 申請(專利權)人: 徐州醫科大學
主分類號: C08J3/075 分類號: C08J3/075;C08L5/08;C08L89/00;C08K3/26;A61L27/26;A61L27/50;A61L27/52;A61L27/54
代理公司: 南京擎天知識產權代理事務所(普通合伙) 32465 代理人: 涂春春
地址: 221000 江*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 包含 bmp2 模擬 sdf 注射 透明 質酸水 凝膠 制備 方法
【權利要求書】:

1.一種包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質酸水凝膠的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

1)制備包含BMP2模擬肽的透明質酸水凝膠前體溶液

1-1)制備己二酸二酰肼修飾的透明質酸HA-ADH;

1-2)制備氧化透明質酸HA-CHO;

1-3)將上述所制備的產物HA-ADH和HA-CHO分別用BMP2模擬肽溶液溶解形成包含BMP2模擬肽的HA-ADH溶液和包含BMP2模擬肽的HA-CHO溶液,兩者即為包含BMP2模擬肽的透明質酸水凝膠前體溶液;

2)制備復合SDF-1的絲素蛋白微球

2-1)制備絲素蛋白微球:以Ca2CO3作為絲素蛋白微球的核心,絲素蛋白包覆于Ca2CO3外;

2-2)將SDF-1與絲素蛋白微球在溶液中通過正負電吸附原理進行復合形成復合SDF-1的絲素蛋白微球;

3)將復合SDF-1的絲素蛋白微球與包含BMP2模擬肽的透明質酸水凝膠前體溶液混合,形成包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質酸水凝膠。

2.根據權利1所述的制備方法,其特征在于,所述己二酸二酰肼修飾透明質酸HA-ADH的具體制備方法為:透明質酸與己二酸二酰肼于EDC和HOBT活化條件下反應制備得到HA-ADH。

3.根據權利1所述的制備方法,其特征在于,所述氧化透明質酸(HA-CHO)的制備方法為:將透明質酸利用高碘酸氧化制備得到HA-CHO。

4.根據權利1所述的制備方法,其特征在于,所述絲素蛋白微球的具體制備方法為:

a、制備絲素蛋白微球核心-Ca2CO3模板:將Na2CO3溶液加入攪拌中的CaCl2溶液中,形成Ca2CO3模板;

b、將步驟a制備的Ca2CO3模板離心,去上清液,加入乙醇-水,離心,去上清液,然后加水離心多次,去上清液;

c、加入水,重懸,然后加入純化的絲素蛋白,垂直混懸后,離心清洗,加甲醇-水,再次垂直混懸,離心清洗;

d、重復步驟c,進行多層包覆;

e、當包裹到理想層時,加入戊二醛溶液,垂直混懸、離心,水洗得絲素蛋白微球。

5.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟a中,Ca2CO3模板制備中,Na2CO3與CaCl2摩爾比為1:1。

6.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟b中,加入乙醇和水的體積比為1:1-1:3。

7.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟c中,加入甲醇和水的體積比為1:5-1:10。

8.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟c中,純化的絲素蛋白的具體制備過程為:向絲素粉中加入LiBr溶液,放于預熱的水浴鍋里攪拌,之后轉移到透析袋超純水透析,之后經離心,濾膜過濾保存。

9.根據權利8所述的制備方法,其特征在于,透析袋的截留分子量為3500 MW。

10.根據權利8所述的制備方法,其特征在于,濾膜的孔徑為0.22 μm。

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