[發明專利]一種包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質酸水凝膠的制備方法在審
| 申請號: | 202211348348.0 | 申請日: | 2022-10-31 |
| 公開(公告)號: | CN115612124A | 公開(公告)日: | 2023-01-17 |
| 發明(設計)人: | 任穎;徐子棠;郭舒琪;封昊天;袁長永;王鵬來 | 申請(專利權)人: | 徐州醫科大學 |
| 主分類號: | C08J3/075 | 分類號: | C08J3/075;C08L5/08;C08L89/00;C08K3/26;A61L27/26;A61L27/50;A61L27/52;A61L27/54 |
| 代理公司: | 南京擎天知識產權代理事務所(普通合伙) 32465 | 代理人: | 涂春春 |
| 地址: | 221000 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 包含 bmp2 模擬 sdf 注射 透明 質酸水 凝膠 制備 方法 | ||
1.一種包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質酸水凝膠的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
1)制備包含BMP2模擬肽的透明質酸水凝膠前體溶液
1-1)制備己二酸二酰肼修飾的透明質酸HA-ADH;
1-2)制備氧化透明質酸HA-CHO;
1-3)將上述所制備的產物HA-ADH和HA-CHO分別用BMP2模擬肽溶液溶解形成包含BMP2模擬肽的HA-ADH溶液和包含BMP2模擬肽的HA-CHO溶液,兩者即為包含BMP2模擬肽的透明質酸水凝膠前體溶液;
2)制備復合SDF-1的絲素蛋白微球
2-1)制備絲素蛋白微球:以Ca2CO3作為絲素蛋白微球的核心,絲素蛋白包覆于Ca2CO3外;
2-2)將SDF-1與絲素蛋白微球在溶液中通過正負電吸附原理進行復合形成復合SDF-1的絲素蛋白微球;
3)將復合SDF-1的絲素蛋白微球與包含BMP2模擬肽的透明質酸水凝膠前體溶液混合,形成包含BMP2模擬肽和SDF-1的可注射透明質酸水凝膠。
2.根據權利1所述的制備方法,其特征在于,所述己二酸二酰肼修飾透明質酸HA-ADH的具體制備方法為:透明質酸與己二酸二酰肼于EDC和HOBT活化條件下反應制備得到HA-ADH。
3.根據權利1所述的制備方法,其特征在于,所述氧化透明質酸(HA-CHO)的制備方法為:將透明質酸利用高碘酸氧化制備得到HA-CHO。
4.根據權利1所述的制備方法,其特征在于,所述絲素蛋白微球的具體制備方法為:
a、制備絲素蛋白微球核心-Ca2CO3模板:將Na2CO3溶液加入攪拌中的CaCl2溶液中,形成Ca2CO3模板;
b、將步驟a制備的Ca2CO3模板離心,去上清液,加入乙醇-水,離心,去上清液,然后加水離心多次,去上清液;
c、加入水,重懸,然后加入純化的絲素蛋白,垂直混懸后,離心清洗,加甲醇-水,再次垂直混懸,離心清洗;
d、重復步驟c,進行多層包覆;
e、當包裹到理想層時,加入戊二醛溶液,垂直混懸、離心,水洗得絲素蛋白微球。
5.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟a中,Ca2CO3模板制備中,Na2CO3與CaCl2摩爾比為1:1。
6.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟b中,加入乙醇和水的體積比為1:1-1:3。
7.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟c中,加入甲醇和水的體積比為1:5-1:10。
8.根據權利4所述的制備方法,其特征在于,步驟c中,純化的絲素蛋白的具體制備過程為:向絲素粉中加入LiBr溶液,放于預熱的水浴鍋里攪拌,之后轉移到透析袋超純水透析,之后經離心,濾膜過濾保存。
9.根據權利8所述的制備方法,其特征在于,透析袋的截留分子量為3500 MW。
10.根據權利8所述的制備方法,其特征在于,濾膜的孔徑為0.22 μm。
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