[發明專利]一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法、材料及應用

有效

• 申請號: 202211327699.3
• 申請日: 2022-10-27
• 公開（公告）號: CN116027032B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發明（設計）人: 李燦鵬;梁還;趙卉;肖淋
• 申請（專利權）人: 云南大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N27/27;G01N27/416;G01N21/78
• 代理公司: 昆明盛鼎宏圖知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53203
• 代理人: 王輝

本發明涉及一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法、材料及應用。所述檢測方法包括以下步驟：步驟1)制備基底材料：Au@SnSesubgt;2/subgt;納米復合材料；步驟2)制備AgCit@NiFe?LDHs納米復合材料；步驟3)制備AgCit@NiFe?LDHs納米復合材料孵化新型冠狀病毒抗體的二抗標記物；步驟4)制備檢測新型冠狀病毒抗原的電化學免疫傳感器；步驟5)制備比色檢測新型冠狀病毒抗原的ELISA免疫傳感器；步驟6)制備檢測新型冠狀病毒抗原的電化學和ELISA免疫傳感器的工作曲線。本發明把電化學與比色相結合，用來檢測新型冠狀病毒，該方法具有較高的靈敏度、較寬的檢測范圍，較快的檢測速度以及操作簡單等優點，可用于實際樣品的快速檢測。

技術領域

本發明屬于新型納米材料、免疫分析和生物傳感技術領域技術領域，尤其是涉及一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法技術領域。

背景技術

感染SARS-CoV-2的人可以保持無癥狀或表現出非特異性臨床癥狀，例如干咳，疲勞，發燒，腹瀉和身體疼痛等癥狀。即使在潛伏期，感染者也具有高度傳染性，可以將病毒傳播給未感染者。因此，對SARS-CoV-2進行大規模快速診斷測試對于病毒檢測、監測和快速管理暴發至關重要。SARS-CoV-2有四種主要的結構蛋白，包括刺突蛋白、膜蛋白、包膜蛋白和核衣殼蛋白。S蛋白是冠狀病毒非常重要的表面蛋白，與病毒的傳染性密切相關。因此，診斷SARS-CoV-2患者對于有效控制感染的快速傳播至關重要。

到目前為止，金標準病毒檢測是實時定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)和最準確的實驗室方法之一。市售qRT-PCR檢測試劑盒的示例有Xpert?Xpress?SARS-CoV-2檢測、CDC2019-新型冠狀病毒實時RT-PCR診斷面板、ExProbeTM?SARS-CoV-2檢測試劑盒、雅培實時SARS-CoV-2RT-PCR試劑盒、和TaqPath?COVID-19組合試劑盒。然而，這些方法也有缺點，因為它們耗時，需要專門的實驗室設置，配備昂貴的儀器和操作熟練的人員。酶聯免疫吸附測定(ELISA)檢測血清中的SARS-CoV-2抗體快速而簡單，但需要昂貴的儀器，周轉時間長，并且容易出現假陰性結果。因此，仍然迫切需要更便宜、更便攜的生物傳感設備來促進COVID-19的快速檢測。

發明內容

比色免疫測定能夠檢測目標肉眼讀數。電化學生物傳感器，具有低成本、便攜性、靈敏度和選擇性。本發明利用ELISA和電化學以實現新型冠狀病毒的靈敏檢測。

本發明提供了一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法，所述ELISA生物免疫傳感器方法包括：使用96孔板依次將新型冠狀病毒抗體、牛血清白蛋白溶液、新型冠狀病毒抗原溶液和Ab2生物探針孵育后，利用生物探針對3,3',5,5'-四甲基聯苯胺的比色反應。

所述的電化學免疫傳感器方法包括：工作電極，參比電極和對電極，新型冠狀病毒特異性抗體，牛血清白蛋白溶液，新型冠狀病毒抗原溶液，納米復合材料孵化前列腺特異性抗體的二抗標記物，所述的參比電極為飽和甘汞電極,對電極為鉑絲電極，工作電極為玻碳電極。其表面依次修飾金納米粒子負載導電性較好的二硒化錫(Au@SnSe₂)和具有優異催化性能的鎳鐵雙氫氧化物負載檸檬酸銀的納米復合材料(AgCit@NiFe-LDHs)。

本發明的目的之一使用Au@SnSe₂作為基底材料，AgCit@NiFe-LDHs作為探針材料以實現對電化學信號探針的放大效果。

本發明的目的之二使用AgCit@NiFe-LDHs作為探針材料，以實現對3,3',5,5'-四甲基聯苯胺的催化效果。

本發明正是為了解決上述問題缺陷，提供一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法。本發明采用如下技術方案實現。

一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法，本發明所述檢測方法包括以下步驟：