[發明專利]一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法、材料及應用

有效

• 申請號: 202211327699.3
• 申請日: 2022-10-27
• 公開（公告）號: CN116027032B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發明（設計）人: 李燦鵬;梁還;趙卉;肖淋
• 申請（專利權）人: 云南大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N27/27;G01N27/416;G01N21/78
• 代理公司: 昆明盛鼎宏圖知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53203
• 代理人: 王輝

1.一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法，其特征在于，所述檢測方法用于非疾病診斷目的，包括以下步驟：

步驟1）制備基底材料：Au@SnSe₂納米復合材料；

步驟2）制備AgCit@NiFe-LDHs納米復合材料；

步驟3）制備AgCit@NiFe-LDHs納米復合材料孵化新型冠狀病毒抗體的二抗標記物；

步驟4）制備檢測新型冠狀病毒抗原的電化學免疫傳感器；

步驟5）制備比色檢測新型冠狀病毒抗原的ELISA免疫傳感器；

步驟6）制備檢測新型冠狀病毒抗原的電化學和ELISA免疫傳感器的工作曲線，利用方波伏安法SWV和ELISA法對目標物進行檢測；

所述步驟1）制備Au@SnSe₂納米復合材料包括：

(1)制備SnSe₂

在12-80?mL乙二醇溶液中加入0.3-2?g?SnCl₂·2H₂O和0.3-2?g?Se粉末；在混合物中加入0.5-3?mL乙二胺，磁力攪拌30?min后，將混合溶液置于高壓釜中，120-180℃保持5?h，得到的產物用去離子水和乙醇洗滌3次；最后，在60°C真空干燥過夜，得到SnSe₂待用；

(2)?制備Au@SnSe₂

稱取3-20?mg步驟(1)制備好的SnSe₂納米花在溶解于1-5?mL?DW，然后在上述溶液中加入50?mM的HAuCl₄?10-60μL；室溫攪拌10分鐘后，緩慢滴加0.1-0.6?mL?100mM?Na₃Cit，磁攪拌30分鐘；最后，將懸浮液12000?rpm離心5?min，收集固體產物；

所述步驟2）制備AgCit@NiFe-LDHs納米復合材料包括：

(1)制備NiFe-LDHs

將0.03-0.3?mmol?Fe(NO₃)₃·9H₂O和0.25-1?mmol?NiCl₂·6H₂O分散在10-100?mL水中，然后在上述溶液中加入0.5-3?mmol尿素，攪拌30分鐘；將混合溶液移至高壓釜中，在120℃下反應12?h，離心冷凍干燥幾次，離心收集得到NiFe-LDHs；

(2)制備AgCit@NiFe-LDHs

將0.03-2?g?NiFe-LDH、0.2-1?g?AgNO₃和0.5-3?g?Na₃Cit溶解在10?ml水中，磁力攪拌30分鐘，形成一個白色的球團；放置懸浮液過夜，離心收集，干燥備用。

2.如權利要求1所述一種基于光電雙信號模式的新型冠狀病毒檢測方法，其特征在于，所述步驟3）制備AgCit@NiFe-LDHs納米復合材料孵化新型冠狀病毒抗體的二抗標記物?Ab2bioconjugates?包括：

將新型冠狀病毒特異性抗體加入到AgCit@NiFe-LDHs分散液中并在4℃?條件下攪拌過夜；用PBS洗掉游離的抗體后，加入BSA反應2-12?h將所得溶液離心分離并將沉淀分散在PBS中以獲得Ab2/AgCit@NiFe-LDHs生物探針材料，將其儲存在4℃備用。