[發明專利]抗CD3的抗體及其應用

在審

• 申請號: 202211327357.1
• 申請日: 2022-10-27
• 公開（公告）號: CN115611985A
• 公開（公告）日: 2023-01-17
• 發明（設計）人: 成贏;曹國帥;李洋洋;武玉偉
• 申請（專利權）人: 合肥天港免疫藥物有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K16/46;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;A61P37/02;G01N33/574;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 雷玉龍

本發明提出了一種抗CD3的抗體及其應用，該抗體包括選自下列至少之一的CDR序列或與其具有至少95％同一性的氨基酸序列：重鏈可變區CDR序列：SEQ ID NO:1?3，輕鏈可變區CDR序列：SEQINNO:4?6。本發明實施例的抗體能夠與人和猴CD3蛋白進行結合，且利用該抗體制備的雙特異性抗體具有較高的人和猴CD3結合活性，均能夠有效治療和/或預防CD3介導的相關疾病。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，具體地，涉及一種抗CD3的抗體及應用。

背景技術

T淋巴細胞在適應性免疫應答和免疫應答的精確調控過程中起著非常重要的作用。T細胞表面T細胞受體(TCR)以α和β或者γ和δ的異二聚體形式存在。T細胞在接受抗原遞呈細胞的抗原肽信號后，TCR并不能直接介導細胞內信號，它需要和CD3分子形成復合物。不僅α和βTCR與CD3形成復合物，γ和δTCR也與CD3形成復合物。TCR或CD3基因的缺失均可導致TCR-CD3復合物從T細胞表面消失。CD3分子是由5條肽鏈形成的3對肽鏈組合而成，90％的CD3是由γε、δε和ζη的方式組合，而另外10％的CD3由γε、δε和ζζ的方式組合。CD3各條肽鏈胞內區的免疫受體酪氨酸活化基序，經由T細胞內酪氨酸蛋白激酶p56磷酸化，募集和結合ZAP-70等酪氨酸激酶后，參與介導TCR活化信號。

在基于T細胞再導向的雙特異性抗體中，CD3這個靶點被廣泛選擇。與免疫卡控點阻斷抗體不同的是，CD3相關的雙特異性抗體可以越過TCR和肽-主要組織相容性復合物(pMHC)來介導T細胞活化，但在突觸中的分子發揮作用過程與經典TCR-pMHC的相互作用很相似。雙特異性抗體的活性受CD3親和力的影響，CD3高親和力雙特異性抗體在體外實驗中有著更好的促殺傷效果，但是在體內存在較高的釋放因子綜合征風險。同時有研究發現非常低親和力的CD3抗體序列在構建雙特異性抗體后也可以有效地刺激T細胞活化。當CD3抗體親和力在合適范圍且腫瘤靶點相關抗體是高親和力時，雙特異性抗體會促使T細胞選擇性地定位到腫瘤局部而不是在外周循環，避免全身活化。

已知的很多CD3抗體為物種特異性的，例如UCHT-1、OKT3和L2K等克隆都只與黑猩猩CD3反應但不與其他靈長類如食蟹猴和恒河猴CD3或鼠CD3反應。由于新藥開發必需經過嚴格的非臨床試驗才能進行臨床研究，因此臨床前的安全性評價找到相關種屬十分必要。而使用黑猩猩進行藥物安全性測試是被高度限制的。目前已知的具有人猴交叉的CD3抗體中，SP34抗體在構成單鏈抗體后親和力會呈現數量級下降。

因此，開發出與其他非人靈長類有特異性交叉的CD3抗體具有較大的實際應用價值。

發明內容

本申請旨在至少在一定程度上解決現有技術中存在的技術問題之一：

本申請的發明人成功地篩選到一種鼠源抗CD3單克隆抗體，該單克隆抗體與人或猴CD3蛋白具有較高的結合活性，此外，發明人將獲得的鼠源抗體的恒定區進行部分人源化，保留鼠源抗CD3單克隆抗體的CDR，以獲得嵌合抗體，更進一步地，將所述嵌合抗體的輕鏈可變區或重鏈可變區中的框架區進行人源化，得到抗CD3的完全人源化抗體，所述嵌合抗體和人源化抗體不僅能夠特異性的靶向結合人CD3蛋白和猴CD3蛋白，而且具有免疫原性低的特點，能夠有效治療和/或預防CD3介導的相關疾病，如自身免疫病。

利用所述抗CD3抗體制備的雙特異性抗體(雙抗)或者多特異性抗體(多抗)同樣能夠特異性的靶向結合人CD3蛋白和猴CD3蛋白，且通常地，基于雙抗或者多抗體的特異性，所述雙抗或者多抗體能夠把T細胞靶向到其它抗原，通過T細胞介導的細胞殺傷作用來消除產生這種抗原的細胞，從而治療多種疾病，如腫瘤。

因此，在本發明的第一方面，本發明提出了一種抗體或抗原結合片段。根據本發明的實施例，包括選自下列至少之一的CDR序列或與其具有至少95％同一性的氨基酸序列：重鏈可變區CDR序列：SEQ ID NO:1～3，輕鏈可變區CDR序列：SEQ ID NO:4～6。根據本發明實施例的抗體或抗原結合片段能夠與人或猴CD3蛋白進行結合，有效治療或預防CD3介導的相關疾病。