[發明專利]引物探針組合以及試劑盒

在審

• 申請號: 202211324990.5
• 申請日: 2022-10-27
• 公開（公告）號: CN116396958A
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 蘭定云;李進福;景培源;慎津進;薛寒;高利飛;鄭業煥
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/689;C12Q1/6851;C12R1/01
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 張柳

本發明涉及檢測試劑領域，特別涉及引物探針組合以及試劑盒。本發明提供的引物探針組具有如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5、SEQ?ID?NO.7和/或SEQ?ID?NO.8任一所示的核苷酸序列的引物和具有如SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.6和/或SEQ?ID?NO.9任一所示的核苷酸序列的探針。該引物探針組及其試劑盒具有靈敏、特異、抗干擾性強和穩定性高等特點。

技術領域

本發明涉及檢測試劑領域，特別涉及引物探針組合以及試劑盒。

背景技術

呼吸道感染分上呼吸道感染和下呼吸道感染，從病原體分又分為病毒感染和細菌感染，但由于各種不同的呼吸道病原體感染導致的癥狀體征基本相同，均表現急性起病，高熱，咳嗽，可伴有寒戰，呼吸道分泌物增加等，但針對不同病原體的治療方法卻大相徑庭，比如不同的病毒需要不同類型的抗病毒藥物，不同的細菌所需要的抗菌素種類區別也很大。而且不同類型病原體感染導致的風險程度也大不相同，有些可以自愈，有些則可能導致嚴重的并發癥危及生命，有些甚至可能導致嚴重呼吸道傳染病的迅速傳播和爆發。因此在臨床診療中盡快確定感染病原體的種類非常關鍵，這對于盡快采取特異性治療措施，從而減少藥物濫用、為提高患者治愈率和存活率爭取寶貴的時間。降低社會醫療負擔和支出，乃至及早發現和排查新型突發性呼吸道傳染病病原體都非常重要。

但在目前的臨床實踐中，都是采用單個靶標的病原體體檢測，醫生往往依據流行病信息經驗、理化、影像等從可能性較高的病原體開始檢查并逐步排除，但這種做法耗時長、高成本，加劇病人痛苦、貽誤治療的最佳時機。為此，很多時候醫生只能在沒有明確病原學診斷的情況下盲目經驗性給藥，這又造成了藥物濫用，增加了毒副作用和病原體耐藥的機率，還造成醫療資源浪費，同時也無益于提高療效。因此，國內外學者多年來一直致力于研發多靶標同時檢測的技術，但是多對引物探針存在于一個反應體系中會導致難以想象的復雜局面：

眾所周知，不同靶標的引物探針之間如果存在數個連續的堿基互補，則很有可能在聚合酶作用下相互結合產生擴增延伸，導致大量的非特異假陽性擴增產物。連續三個堿基與其它序列相同的概率為1/4×1/4×1/4＝1/64，顯然隨著引物探針數量的增加，發生不同序列間相互重疊的或互補的幾率將迅速增加，甚至幾乎無法避免，因此以往用于單靶標檢測的引物探針將不適用。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了引物探針組合以及試劑盒，其具有靈敏、特異、抗干擾性強和穩定性高等特點。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了引物探針組，包括：

(1)、具有如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5、SEQ?ID?NO.7和/或SEQ?ID?NO.8任一所示的核苷酸序列的引物；和

(2)、具有如SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.6和/或SEQ?ID?NO.9任一所示的核苷酸序列的探針。

在本發明的一些具體實施方案中，上述引物探針組還包括：

(3)、具有如SEQ?ID?NO.10和/或SEQ?ID?NO.11所示核苷酸序列引物；和

(4)、具有如SEQ?ID?NO.12所示核苷酸序列的探針。

在本發明的一些具體實施方案中，上述引物探針組還具有：

(5)、如(1)～(4)任一所示的核苷酸序列的互補序列；和/或

(6)、如(1)～(5)任一所示的核苷酸序列經取代、缺失或添加一個或多個堿基獲得的核苷酸序列，且功能與(1)～(4)任一所示的相同或相似；和/或

(7)、與(1)～(6)任一所示的核苷酸序列同源性達到不低于80％的核苷酸序列。