[發明專利]一種用于檢測引起牛腹瀉病病毒性病原的多重實時熒光PCR檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202211320405.4
• 申請日: 2022-10-26
• 公開（公告）號: CN116064957A
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 徐義剛;韓言言;王美;李園;姜勝;宋厚輝
• 申請（專利權）人: 浙江農林大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 馬鑫

1.一種用于檢測引起牛腹瀉病病毒性病原的多重實時熒光PCR檢測試劑盒，所述的引起牛腹瀉病病毒性病原包括牛病毒性腹瀉病毒(Bovine?Viral?Diarrhea?Virus，BVDV)、牛冠狀病毒(Bovine?Coronavirus，BCoV)、牛輪狀病毒(Bovine?rotavirus，BRV)和牛細小病毒(Bovine?parvovirus，BPV)，其特征在于，所述的多重實時熒光PCR檢測試劑盒含有分別用于檢測牛病毒性腹瀉病毒、牛冠狀病毒、牛輪狀病毒和牛細小病毒的實時熒光PCR引物對以及FastStartUniversal?SYBR?GreenMaster；

其中，用于檢測牛病毒性腹瀉病毒的實時熒光PCR引物對由SEQ?ID?NO.1所示的上游引物以及SEQ?ID?NO.2所示的下游引物組成；

其中，用于檢測牛冠狀病毒的實時熒光PCR引物對由SEQ?ID?NO.3所示的上游引物以及SEQ?ID?NO.4所示的下游引物組成；

其中，用于檢測牛輪狀病毒的實時熒光PCR引物對由SEQ?ID?NO.5所示的上游引物以及SEQ?ID?NO.6所示的下游引物組成；

其中，用于檢測牛細小病毒的實時熒光PCR引物對由SEQ?ID?NO.7所示的上游引物以及SEQ?ID?NO.8所示的下游引物組成。

2.如權利要求1所述的多重實時熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒用于檢測牛病毒性腹瀉病毒、牛冠狀病毒、牛輪狀病毒和牛細小病毒時，其多重實時熒光PCR反應體系包括：FastStart?Universal?SYBR?Green?Master?10μL、分別用于檢測牛病毒性腹瀉病毒、牛冠狀病毒、牛輪狀病毒和牛細小病毒的上下游引物各0.2μL、模板4μL，DEPC處理水補足20μL。

3.如權利要求2所述的多重實時熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒用于檢測牛病毒性腹瀉病毒、牛冠狀病毒、牛輪狀病毒和牛細小病毒時，多重實時熒光PCR反應條件為：95℃10min；95℃15s，60℃1min。

4.權利要求1-3任一項所述的多重實時熒光PCR檢測試劑盒在制備同時檢測牛病毒性腹瀉病毒、牛冠狀病毒、牛輪狀病毒和牛細小病毒試劑中的應用。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述的試劑為實時熒光PCR檢測試劑。