[發明專利]一種復合微球固定化酶及其固定化方法和應用在審
| 申請號： | 202211305061.X | 申請日： | 2022-10-24 |
| 公開（公告）號： | CN115505586A | 公開（公告）日： | 2022-12-23 |
| 發明（設計）人： | 黃哲倫;王德強 | 申請（專利權）人： | 安徽工業大學 |
| 主分類號： | C12N11/10 | 分類號： | C12N11/10;C12N9/20;C12N9/34;C12N9/50;A61K38/46;A61K38/47;A61K38/48;A61K9/16;A61P1/14 |
| 代理公司： | 安徽順超知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 34120 | 代理人： | 陳慕 |
| 地址： | 243071 安徽省馬鞍*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 復合 固定 及其 方法 應用 | ||
1.一種復合微球固定化酶，其特征在于，該復合微球固定化酶是由消化酶負載于復合微球載體上得到的，所述復合微球載體為亞微米級的果膠/殼聚糖微球。
2.根據權利要求1所述的復合微球固定化酶，其特征在于：所述消化酶為脂肪酶、蛋白酶、糖化酶中的至少一種。
3.根據權利要求1所述的復合微球固定化酶，其特征在于：所述消化酶在負載后的酶活保留率＞75％。
4.根據權利要求1所述的復合微球固定化酶，其特征在于：所述果膠/殼聚糖微球是由低酯化度的果膠、殼聚糖按一定質量比進行交聯反應得到的微球。
5.根據權利要求4所述的復合微球固定化酶，其特征在于：所述果膠、殼聚糖的質量比為0.5～2:1。
6.如權利要求1～5任一項所述的復合微球固定化酶的固定化方法，其特征在于，該固定化方法采用分步固定化方式，具體包括如下步驟：
1)將一定體積的75％硫酸溶液溶于適量的去離子水中，稱取果膠加入上述酸性溶液降解；于60℃下保溫4～8h，得到A溶液。
2)將一定體積的冰醋酸溶于適量的去離子水中，稱取殼聚糖加入后混合均勻，超聲一段時間，得到B溶液；
3)將得到的A溶液和B溶液混合，并用高壓均質機在10000rpm下處理3～10min，靜置一段時間后，得到果膠/殼聚糖微球混合液；
4)將得到的果膠/殼聚糖微球混合液與消化酶混合，并用高壓均質機在10000rpm下處理3～5min。
7.根據權利要求6所述的復合微球固定化酶的固定化方法，其特征在于：A溶液中的果膠和B溶液中的殼聚糖的質量比為0.5～2:1；果膠/殼聚糖微球混合液中的果膠/殼聚糖微球和消化酶的質量比為1:0.25～0.75。
8.如權利要求1～5任一項所述的復合微球固定化酶的固定化方法，其特征在于，該固定化方法采用同步固定化方式，具體包括如下步驟：
1)將一定體積的75％硫酸溶液溶于適量的去離子水中，稱取果膠加入上述酸性溶液降解；于60℃下保溫4～8h，得到A溶液。
2)將一定體積的冰醋酸溶于適量的去離子水中，稱取殼聚糖加入后混合均勻，超聲一段時間，得到B溶液；
3)將消化酶配置成2g/L的酶溶液，記為C溶液；
4)將得到的A溶液、B溶液、C溶液按照一定配比進行混合，用高壓均質機在10000rpm下處理3～5min。
9.根據權利要求8所述的固定化酶的固定化方法，其特征在于：A溶液中的果膠和B溶液中的殼聚糖的質量比為0.5～2:1；A溶液中的果膠、B溶液中的殼聚糖質量總和與消化酶的質量比為1:0.25～0.75。
10.如權利要求1～5任一項所述的復合微球固定化酶在制備治療人體消化不良藥物中的應用。
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