[發明專利]一種檢測重金屬的磁微粒化學發光試劑盒

在審

• 申請號: 202211288664.3
• 申請日: 2022-10-20
• 公開（公告）號: CN115950877A
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發明（設計）人: 周明慧;王松雪;田巍;劉洪美
• 申請（專利權）人: 國家糧食和物資儲備局科學研究院
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/543
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務所(普通合伙) 11732
• 代理人: 馬歡歡

1.一種檢測重金屬的磁微粒化學發光試劑盒，其特征在于，包括如下組分：重金屬抗原、抗重金屬抗體、鏈霉親和素包被的磁微粒、發光標記物偶聯的抗IgG抗體、與發光標記物相適用的底物液、重金屬基體標準溶液、反應稀釋液以及洗滌液。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述重金屬抗原和抗重金屬抗體為生物素化重金屬抗原和抗重金屬抗體或重金屬抗原和生物素化抗重金屬抗體。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述生物素化重金屬抗原為生物素和重金屬抗原形成的復合物；所述重金屬抗原由重金屬、重金屬螯合劑、載體蛋白偶聯形成；所述生物素化抗重金屬抗體為生物素和抗重金屬抗體偶聯形成復合物；

所述重金屬螯合劑為乙二胺四乙酸、二乙基三胺五乙酸、1，4，7，10-四氮雜環十二烷-1，4，7，10-四羧酸、2-(4-氨基芐基)-二亞乙基三胺五乙酸、1-(4-異硫氰芐基)乙烯基二胺-N,N,N,N-四乙酸中的一種或多種；所述載體蛋白為卵清蛋白、血清白蛋白或鎖鑰藍蛋白；所述生物素化抗重金屬抗體為生物素、抗重金屬抗體形成的復合物。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述抗重金屬抗體為單克隆抗體或多克隆抗體，所述單克隆抗體或多克隆抗體經辛酸-硫酸銨法純化。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述鏈霉親和素包被的磁微粒由鏈霉親和素與磁微粒偶聯制備，所述磁微粒以四氧化三鐵或三氧化二鐵超順磁性材料為內核，外圍包覆聚苯乙烯或葡聚糖，通過物理或化學的方法活化使磁微粒表面產生氨基、甲苯磺酰基、羧基或環氧基基團；所述磁微粒的粒徑為1～2μm。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述發光標記物偶聯的抗IgG抗體中的發光標記物為堿性磷酸酶、吖啶酯或魯米諾；所述發光標記物偶聯的抗IgG抗體中的抗IgG抗體為抗重金屬抗體同源生產的可識別的抗體，所述抗IgG抗體的濃度為0.01～1mg/mL。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述重金屬基體標準溶液是由0～0.5mg/kg不同濃度梯度的匹配糧食有證標準物質，采用稀酸提取的方式制得的工作標準曲線；所述稀酸提取液為2～6％硝酸溶液。水樣標準溶液是由0～2ng/mL不同濃度繪制成工作標準曲線。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述反應稀釋液由0.01～1mM?Tris緩沖液、0.01～1mM重金屬螯合劑、0.08～0.12％吐溫、0.4～0.6％牛血清白蛋白、0.01-1M?pH調節劑組成，所述重金屬螯合劑為乙二胺四乙酸、二乙基三胺五乙酸、1，4，7，10-四氮雜環十二烷-1，4，7，10-四羧酸、2-(4-氨基芐基)-二亞乙基三胺五乙酸、1-(4-異硫氰芐基)乙烯基二胺-N,N,N,N-四乙酸中的一種或多種；所述pH調節劑為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、三羥甲基氨基甲烷及其鹽酸鹽、鹽酸、硝酸中的一種或多種。

9.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述洗滌劑為0.01～0.02M?Tris-HCl緩沖液、0.1～0.2％吐溫-20組成。

10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括反應管；所述反應管的材料為透明聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯或玻璃。