[發明專利]一種檢測重金屬的磁微粒化學發光試劑盒

在審

• 申請號: 202211288664.3
• 申請日: 2022-10-20
• 公開（公告）號: CN115950877A
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發明（設計）人: 周明慧;王松雪;田巍;劉洪美
• 申請（專利權）人: 國家糧食和物資儲備局科學研究院
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/543
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務所(普通合伙) 11732
• 代理人: 馬歡歡

本發明涉及生物技術免疫學檢測技術領域。本發明提供了一種檢測重金屬的磁微粒化學發光試劑盒，所述試劑盒包括如下組分：重金屬抗原、抗重金屬抗體、鏈霉親和素包被的磁微粒、發光標記物偶聯的抗IgG抗體、與發光標記物相適用的底物液、重金屬基體標準溶液、反應稀釋液以及洗滌液。本發明的試劑盒采用磁微粒化學發光檢測方法，具有高靈敏、高特異性、高準確度的特點，與傳統ELISA方法和膠體金免疫層析試紙條方法相比，人工操作步驟大大減少，抗原抗體用量大幅減少，成本大大降低，并可實現自動化檢測，可用于基層實驗室對于食品及制品重金屬的大范圍篩選和檢測。

技術領域

本發明涉及生物技術免疫學檢測技術領域，尤其涉及一種檢測重金屬的磁微粒化學發光試劑盒。

背景技術

在重金屬快速檢測方法中，以抗原抗體反應為基礎的快速檢測方法有諸多研究，包括酶聯免疫吸附法、生物芯片法等，大多需要包被、封閉、反應、孵育、洗板等復雜操作，而且均以人工操作為主，容易對實驗結果引入人為誤差，過程條件控制無法保證，限制了其在市場上的廣泛推廣與應用。因此，在面臨多指標、多樣品快速自動化檢測的需求下，開發一種新型、快速、高靈敏、可自動化的重金屬檢測方法尤為重要。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測重金屬的磁微粒化學發光試劑盒，人工操作步驟大大減少，抗原抗體用量大幅減少，成本大大降低，可用于基層實驗室對于重金屬食品及制品的大范圍篩選和檢測，配合POCT檢測平臺，可實現重金屬檢測自動化。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種檢測重金屬的磁微粒化學發光試劑盒，包括如下組分：重金屬抗原、抗重金屬抗體、鏈霉親和素包被的磁微粒、發光標記物偶聯的抗IgG抗體、與發光標記物相適用的底物液、重金屬基體標準溶液、反應稀釋液以及洗滌液。

作為優選，所述重金屬抗原和抗重金屬抗體為生物素化重金屬抗原和抗重金屬抗體或重金屬抗原和生物素化抗重金屬抗體。

作為優選，所述生物素化重金屬抗原為生物素和重金屬抗原形成的復合物；所述重金屬抗原由重金屬、重金屬螯合劑、載體蛋白偶聯形成；所述生物素化抗重金屬抗體為生物素和抗重金屬抗體偶聯形成復合物；

所述重金屬螯合劑為乙二胺四乙酸、二乙基三胺五乙酸、1，4，7，10-四氮雜環十二烷-1，4，7，10-四羧酸、2-(4-氨基芐基)-二亞乙基三胺五乙酸、1-(4-異硫氰芐基)乙烯基二胺-N,N,N,N-四乙酸中的一種或多種；所述載體蛋白為卵清蛋白、血清白蛋白或鎖鑰藍蛋白；所述生物素化抗重金屬抗體為生物素、抗重金屬抗體形成的復合物。

作為優選，所述抗重金屬抗體為單克隆抗體或多克隆抗體，所述單克隆抗體或多克隆抗體經辛酸-硫酸銨法純化。

作為優選，所述鏈霉親和素包被的磁微粒由鏈霉親和素與磁微粒偶聯制備，所述磁微粒以四氧化三鐵或三氧化二鐵超順磁性材料為內核，外圍包覆聚苯乙烯或葡聚糖，通過物理或化學的方法活化使磁微粒表面產生氨基、甲苯磺酰基、羧基或環氧基基團；所述磁微粒的粒徑為1～2μm。

作為優選，所述發光標記物偶聯的抗IgG抗體中的發光標記物為堿性磷酸酶、吖啶酯或魯米諾；所述發光標記物偶聯的抗IgG抗體中的抗IgG抗體為抗重金屬抗體同源生產的可識別的抗體，所述抗IgG抗體的濃度為0.01～1mg/mL。

作為優選，所述重金屬基體標準溶液是由0～0.5mg/kg不同濃度梯度的匹配糧食有證標準物質，采用稀酸提取的方式制得的工作標準曲線；所述稀酸提取液為2～6％硝酸溶液。水樣標準溶液是由0～2ng/mL不同濃度繪制成工作標準曲線。