[發明專利]一種利用CD276評價間充質干細胞生物學效力的方法

有效

• 申請號: 202211276848.8
• 申請日: 2022-10-19
• 公開（公告）號: CN115356487B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 杜文靜;韓之波;李文學;喻昊;趙夢;嚴淑琳;賈紅紅;毛愛斌;聶釩宇
• 申請（專利權）人: 天津昂賽細胞基因工程有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/50
• 代理公司: 北京同輝知識產權代理事務所(普通合伙) 11357
• 代理人: 何靜

1.一種利用CD276評價間充質干細胞生物學效力的方法，其特征在于，通過收集并裂解一定數量的細胞，利用ELISA檢測的方法定量分析細胞裂解液中CD276的含量來評價間充質干細胞的生物學效力，所述生物學效力是指其與活化的外周血單個核細胞(Peripheralblood?mononuclear?cell,PBMC)共培養，對PBMC分泌TNF-α和IFN-γ的抑制能力，間充質干細胞中CD276的表達水平與其對PBMC分泌TNF-α和IFN-γ的抑制水平呈顯著正相關。

2.據權利要求1所述的一種利用CD276評價間充質干細胞生物學效力的方法，其特征在于，所述間充質干細胞來源為臍帶、骨髓、胎盤或脂肪。

3.根據權利要求2所述的一種利用CD276評價間充質干細胞生物學效力的方法，其特征在于，具體包括如下步驟：

S1：收集細胞：收集并計數細胞；

S2：裂解細胞：將S1計數好的細胞離心，去掉上清保留細胞沉淀，按照單位數目細胞用細胞裂解液將其在冰上充分裂解；

S3：收集細胞裂解液：將S2細胞裂解液在低溫條件下高速離心，收集裂解液上清用于CD276的蛋白含量檢測；

S4：用人CD276?ELISA試劑盒檢測上清液中CD276的濃度，并根據細胞計數結果計算單位數量細胞所含CD276的蛋白總量；

S5：當10⁶個細胞中所含CD276的蛋白含量超過13.5ng時，判定該間充質干細胞具有免疫抑制的生物學效力。

4.根據權利要求3所述的一種利用CD276評價間充質干細胞生物學效力的方法，其特征在于，應用于細胞庫及細胞注射液質量檢測標準的制定。