[發明專利]一種利用HPLC測定丙硫異煙胺中雜質含量的方法

在審

• 申請號: 202211276152.5
• 申請日: 2022-10-18
• 公開（公告）號: CN115629139A
• 公開（公告）日: 2023-01-20
• 發明（設計）人: 高政;左帥;徐偉;顧麗;周菊;魏征;耿炎
• 申請（專利權）人: 江蘇慈星藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 南京智轉慧移知識產權代理有限公司 32649
• 代理人: 邢少華

本發明公開了一種利用HPLC測定丙硫異煙胺中雜質含量的方法，屬于藥物分析技術領域。丙硫異煙胺中雜質包括4?氰基吡啶、2?丙基?4?氰基吡啶、異硫酰胺、2?丙基異煙酰胺和乙硫異煙胺；包括以下步驟：1)配置供試品溶液和對照溶液；2)設置高效液相檢測條件：色譜柱以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，規格為250mm×4.6mm，填料粒徑為5μm，柱溫為35℃，以緩沖鹽為流動相A，以乙腈為流動相B；流速為1.0mL/min進行梯度洗脫；3)分別精密吸取供試品溶液和對照溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。本發明能夠快速、有效、準確和可靠的分離檢測出丙硫異煙胺中有關物質，有利于提高丙硫異煙胺的產品質量。

技術領域

本發明屬于藥物分析技術領域，具體涉及一種利用HPLC測定丙硫異煙胺中雜質含量的方法。

背景技術

丙硫異煙胺為抗結核病藥，僅對分枝桿菌有效，與其他抗結核藥聯合用于結核病一線藥物治療無效者。

丙硫異煙胺為異煙酸的衍生物，可能對肽類合成具有抑制作用。本品對結核分枝桿菌的作用取決于感染部位的藥物濃度，低濃度時僅具有抑菌作用，高濃度具有殺菌作用。抑制結核桿菌分枝菌酸的合成。本品與乙硫異煙胺有部分交叉耐藥現象。

根據丙硫異煙胺工藝路線，丙硫異煙胺在生產生產過程中會產生雜質A(4-氰基吡啶)、B(2-丙基-4-氰基吡啶)、C(異硫酰胺)、D(2-丙基異煙酰胺)、E(乙硫異煙胺)，針對雜質A、B、C、D、E分離測定的相關文獻報道極少，因此，提供一種測定丙硫異煙胺中雜質含量的方法對于原料制劑的生成和貯存具有重要意義。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明所要解決的技術問題是提供一種利用HPLC測定丙硫異煙胺中雜質含量的方法。

為了解決上述問題，本發明采用的技術方案為：

一種利用HPLC測定丙硫異煙胺中雜質含量的方法，包括以下步驟：

1)配置供試品溶液和對照溶液；供試品溶液的制備是方法為：取丙硫異煙胺，用乙腈溶解稀釋成每1mL中含丙硫異煙胺1mg的溶液作為供試品溶液；對照溶液的制備方法為：取丙硫異煙胺對照品10mg、雜質A對照品、雜質B對照品、雜質C對照品和雜質D對照品各15mg、雜質E對照品25mg，置不同10mL量瓶中用乙腈超聲溶解并稀釋至刻度，作為各化合物對照品儲備液I；精密量取丙硫異煙胺對照品、雜質A對照品、雜質B對照品、雜質C對照品和雜質D對照品儲備液I各2.5mL，雜質E對照品儲備液I5mL置同一50mL量瓶，加稀釋劑稀釋至刻度，作為對照品儲備液II；精密量取對照品儲備液II 1mL置50mL量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，作為對照品溶液；

2)設置高效液相檢測條件：色譜柱以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，規格為250mm×4.6mm，填料粒徑為5μm，柱溫為35℃，以緩沖鹽為流動相A，以乙腈為流動相B；流速為1.0mL/min進行梯度洗脫；

3)分別精密吸取供試品溶液和對照溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；

丙硫異煙胺中雜質包括雜質A、雜質B、雜質C、雜質D和雜質E；雜質A為4-氰基吡啶、雜質B為2-丙基-4-氰基吡啶、雜質C為異硫酰胺、雜質D為2-丙基異煙酰胺，雜質E為乙硫異煙胺。

進一步的，步驟2)中，緩沖鹽為2g/l磷酸二氫鈉，用磷酸調節PH至3.0。

進一步的，步驟2)中，梯度洗脫的條件為：0-8min，流動相A的體積百分比為95％，流動相B的體積百分比為5％；8-40min，流動相A的體積百分比從95％過渡到60％，流動相B的體積百分比從5％過渡40％；40-50min，流動相A的體積百分比為60％，流動相B的體積百分比為40％；50-50.1min，流動相A的體積百分比從60％過渡到95％，流動相B的體積百分比從40％過渡到5％；50.1-55min，流動相A的體積百分比為95％，流動相B的體積百分比為5％。