[發(fā)明專利]一種銀黃二陳合劑中多種活性成分同時(shí)測定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211260041.5
• 申請日: 2022-10-14
• 公開（公告）號: CN115575541A
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魏秀麗;李有志;張志民;陳偉;張傳津;馮濤;湯文利;鄭慧慧;李莎莎
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省飼料獸藥質(zhì)量檢驗(yàn)中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發(fā)明公開了一種銀黃二陳合劑中多種活性成分同時(shí)測定方法，屬于獸藥中有效成分檢測領(lǐng)域，包括如下步驟：制備含有各標(biāo)準(zhǔn)品的混合對照儲(chǔ)備溶液；采用萃取劑對銀黃二陳合劑樣品進(jìn)行超聲萃取，離心、過濾，得提取液；采用超高效液相色譜法對多種活性成分同時(shí)進(jìn)行檢測；色譜柱為WATERS UPLC HSS T₃色譜柱；流動(dòng)相A為乙腈+0.05％磷酸，流動(dòng)相B為0.05％磷酸水溶液，并對梯度洗脫程序進(jìn)行了摸索。通過光譜圖、保留時(shí)間、色譜峰面積等各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行定性或定量檢測，方法簡便快速、分離效果好，測定精度高，結(jié)果重現(xiàn)性好，易于觀察，專屬性強(qiáng)，色譜峰峰形良好，既達(dá)到中國獸藥典的要求，又節(jié)省時(shí)間、試劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于獸藥中有效成分檢測領(lǐng)域，具體涉及一種銀黃二陳合劑中多種活性成分同時(shí)測定方法。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

銀黃二陳合劑為中獸藥成方制劑，收載于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第158號銀黃二陳合劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第158號銀黃二陳合劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，對黃芩(黃芩苷)、金銀花(綠原酸)、陳皮(橙皮苷)、甘草(甘草苷)進(jìn)行薄層鑒別，含量測定項(xiàng)主要針對金銀花中的綠原酸和黃芩中的黃芩苷進(jìn)行，測定過程中采用兩個(gè)色譜系統(tǒng)分別進(jìn)行定量，操作起來非常繁瑣。

進(jìn)一步的，第158號銀黃二陳合劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，對黃芩苷、橙皮苷、甘草苷采用的薄層色譜檢測方法中，薄層色譜檢測前期準(zhǔn)備復(fù)雜，需要展開晾干、檢視查看結(jié)果等多個(gè)步驟，費(fèi)時(shí)費(fèi)力；檢測結(jié)果的熒光斑點(diǎn)受環(huán)境溫濕度、人為操作、邊緣效應(yīng)等因素的干擾比較大，斑點(diǎn)常常不清晰，結(jié)果不易判定，重現(xiàn)性差；而且整個(gè)檢測過程費(fèi)時(shí)、費(fèi)試劑，操作繁瑣。且在實(shí)際檢驗(yàn)工作中層析用的展開劑毒性大，例如：正丁醇，乙酸乙酯，甲酸，冰醋酸，甲醇等，對實(shí)驗(yàn)人員的傷害比較大。因此，迫切需要一種新的銀黃二陳合劑檢測方法以克服上述問題。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種銀黃二陳合劑中多種活性成分同時(shí)測定方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：

一方面，一種銀黃二陳合劑中多種活性成分同時(shí)測定方法，包括如下步驟：

(1)分別稱取多種活性成分的標(biāo)準(zhǔn)品并用有機(jī)溶劑配置成同時(shí)含有各標(biāo)準(zhǔn)品的混合對照儲(chǔ)備溶液；

(2)采用萃取劑對銀黃二陳合劑進(jìn)行超聲萃取，離心、過濾后得待測液；

(3)采用超高效液相色譜儀分別對混合對照儲(chǔ)備溶液和待測液進(jìn)行檢測，通過色譜圖、保留時(shí)間對待測液中的多種活性成分進(jìn)行定性分析，通過色譜峰面積計(jì)算出待測液中多種活性成分的含量；

所述多種活性成分為：新綠原酸、綠原酸、咖啡酸、隱綠原酸、4,5-二-O-咖啡酰奎寧酸、菊苣酸、甘草苷、甘草酸、黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素和橙皮苷；

色譜條件為：流動(dòng)相A為乙腈+0.05％磷酸，流動(dòng)相B為0.05％磷酸水溶液，柱溫為38-42℃；流動(dòng)相的流速：0.35mL/min；進(jìn)樣量：0.5-5μL；

檢測條件：PDA檢測器，檢測波長為238nm、251nm、278nm、284nm、327nm。。

本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明通過液相色譜法同時(shí)把銀黃二陳合劑中金銀花(新綠原酸、綠原酸、咖啡酸、隱綠原酸等)，甘草(甘草苷、甘草酸)，黃芩(黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素)，陳皮(橙皮苷)等4種中藥組分中的多種主要成分一次測定出來，方法簡便快速、分離效果好，測定精度高，結(jié)果重現(xiàn)性好，易于觀察，專屬性強(qiáng)，色譜峰峰形良好，既達(dá)到中國獸藥典的要求，又節(jié)省時(shí)間、試劑。