[發(fā)明專利]一株龍膽內(nèi)生真菌促生抗病發(fā)酵液及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211255752.3
• 申請日: 2022-10-13
• 公開（公告）號: CN115449486A
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王冬梅;劉曉秋;潘英妮;任舒蒙;郭瑞雪;胡天帥
• 申請（專利權(quán)）人: 沈陽藥科大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;A01N63/38;A01P3/00;A01P21/00;A01G13/00;A01G7/06;C12R1/885
• 代理公司: 北京中濟(jì)緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 覃婧嬋

本發(fā)明屬于植物內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物生物防治技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株龍膽內(nèi)生真菌促生抗病發(fā)酵液及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明所述發(fā)酵液是由龍膽內(nèi)生真菌木霉屬內(nèi)生菌木霉(Trichoderma sp.)3711菌種活化和發(fā)酵培養(yǎng)的步驟制備得到的。經(jīng)抑菌和促生實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明所述發(fā)酵液具有顯著的廣譜抗植物病原菌和促進(jìn)植物(特別是農(nóng)作物)生長的兩方面作用。此外，本發(fā)明所述以從龍膽中分離得到的木霉屬內(nèi)生菌木霉(Trichoderma sp.)3711為基礎(chǔ)制備得到的發(fā)酵液制備方法簡單、制備成本低廉，具有良好的經(jīng)濟(jì)價值和廣闊的市場前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物生物防治技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株龍膽內(nèi)生真菌促生抗病發(fā)酵液及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前，化學(xué)農(nóng)藥和化肥大量使用存在諸多弊端，如環(huán)境污染日益嚴(yán)重、病害蟲抗性顯著提高、人畜安全受到威脅等等，產(chǎn)生的生態(tài)問題層出不窮，且目前公眾對保障食品安全的呼聲越來越高。因此，開發(fā)安全高效綠色環(huán)保的新型農(nóng)藥和肥料迫在眉睫。

微生物發(fā)酵工藝簡單、成本相對低廉、不易使病蟲害產(chǎn)生抗性、對人和環(huán)境溫和，已經(jīng)成為開發(fā)新型生物農(nóng)藥和肥料中的熱點(diǎn)。作為微生物之一的植物內(nèi)生菌在開發(fā)新型農(nóng)藥和肥料方面因具有極為廣闊的前景而備受矚目。植物內(nèi)生菌是指與宿主植物具有協(xié)同進(jìn)化作用且與宿主植物已經(jīng)形成互惠共生關(guān)系的一類真菌。植物內(nèi)生真菌與宿主植物的互惠共生關(guān)系表現(xiàn)為：宿主植物產(chǎn)生的光合產(chǎn)物可為內(nèi)生真菌提供營養(yǎng)；內(nèi)生真菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物可以刺激宿主植物的生長發(fā)育，同時可以提高植物的抗逆性。因此，植物內(nèi)生菌的代謝產(chǎn)物為發(fā)現(xiàn)新化合物、篩選新藥物等，提供豐富的原料和廣闊的空間，因此植物內(nèi)生菌已成為多領(lǐng)域多學(xué)科的研究熱點(diǎn)。

龍膽是龍膽科植物條頁龍膽Gentiana manshurica Kitag.、龍膽Gentianascabra Bge.、三花龍膽Gentiana trifloral Pall.或堅(jiān)龍膽Gentiana rigescensFranch. 的干燥根和根莖。國內(nèi)外研究者從龍膽中分離得到了多種成分，比如：裂環(huán)烯醚萜苷類、多糖類、生物堿類等。龍膽味苦、性寒，為清肝膽濕熱，瀉下焦郁火之常用中藥。在臨床上，龍膽常用于利膽、健胃、保肝、中樞興奮等作用，其抗炎、抗菌作用也是很明顯。根據(jù)此前的研究結(jié)果推測，在龍膽中可能存在具有較強(qiáng)的抗植物病原菌活性的內(nèi)生真菌，并且其次生代謝產(chǎn)物可能具有促生作用。因此，研究龍膽內(nèi)生真菌對新時期農(nóng)藥和肥料的開發(fā)和使用具有理論和實(shí)際上的參考價值。

但是，目前尚無來自龍膽內(nèi)生真菌的同時具有促生和抗病作用的農(nóng)藥和植物生長助劑。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問題以及填補(bǔ)相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)空白，本發(fā)明以從龍膽中分離得到的木霉屬內(nèi)生菌木霉(Trichoderma sp.)3711為基礎(chǔ)，通過發(fā)酵培養(yǎng)得到的代謝物，并將其開發(fā)成主要用于廣譜抗植物病原菌和促進(jìn)植物生長的產(chǎn)品。

具體地，通過以下幾個方面的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明：

在第一個方面中，本發(fā)明提供了一種龍膽內(nèi)生真菌，所述龍膽內(nèi)生真菌用于制備具有抗植物病原菌和促進(jìn)植物生長作用的發(fā)酵液，所述龍膽內(nèi)生真菌是木霉屬內(nèi)生菌木霉(Trichoderma sp.3711)，所述木霉(Trichoderma sp.3711) 的微生物保藏號為CCTCC NO:M 20211203，保藏時間為2021年9月24日，保藏地點(diǎn)為中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏單位地址為中國武漢武漢大學(xué)。

在第二個方面中，本發(fā)明提供了一種具有抗植物病原菌和促進(jìn)植物生長作用的發(fā)酵液，所述發(fā)酵液由上述第一個方面所述的龍膽內(nèi)生真菌制備得到。

作為可選的方式，在所述發(fā)酵液中，所述植物病原菌包括以下一種或多種：瓜果腐霉病原菌(FM)(Pythium aphanidermatum)、水稻紋枯病原菌(WK) (Rhizoctonia solani Kühn)、黃瓜枯萎病原菌(KW)(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)。