[發明專利]一株龍膽內生真菌促生抗病發酵液及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202211255752.3
• 申請日: 2022-10-13
• 公開（公告）號: CN115449486A
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 王冬梅;劉曉秋;潘英妮;任舒蒙;郭瑞雪;胡天帥
• 申請（專利權）人: 沈陽藥科大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;A01N63/38;A01P3/00;A01P21/00;A01G13/00;A01G7/06;C12R1/885
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 覃婧嬋

1.一種龍膽內生真菌，其特征在于：所述龍膽內生真菌用于制備具有抗植物病原菌和促進植物生長作用的發酵液，所述龍膽內生真菌是木霉屬內生菌木霉(Trichoderma sp.3711)，所述木霉(Trichoderma sp. 3711)的微生物保藏號為CCTCC NO:M 20211203，保藏時間為2021年9月24日，保藏地點為中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，保藏單位地址為中國武漢武漢大學。

2.一種具有抗植物病原菌和促進植物生長作用的發酵液，其特征在于：所述發酵液由權利要求1所述的龍膽內生真菌制備得到。

3.根據權利要求2所述的發酵液，其特征在于：所述植物病原菌包括以下一種或多種：瓜果腐霉病原菌(FM)(Pythium aphanidermatum)、水稻紋枯病原菌(WK)(Rhizoctoniasolani Kühn)、黃瓜枯萎病原菌(KW)(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)。

4.權利要求2或權利要求3所述的具有抗植物病原菌和促進植物生長作用的發酵液的制備方法，其特征在于：所述制備方法包括以下步驟：

(1)菌種活化：在無菌條件下，將龍膽內生真菌的菌種，轉接在已滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂固體培養基(PDA培養基)平板中，置培養箱內溫度24-30℃恒溫培養3-6天，得到活化菌種；

(2)發酵培養：在無菌條件下，用打孔器打取菌餅，接種到含馬鈴薯葡萄糖液體培養基(PD培養基)的錐形瓶中，封口膜包扎好，置于恒溫振蕩培養箱中，搖床培養4-8天，所得發酵液經4層紗布過濾，即得到所述龍膽內生真菌的發酵液。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：在步驟(1)中使用的所述PDA培養基為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水1000mL。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：在步驟(2)中使用的所述PD培養基為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、蒸餾水1000mL。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：在步驟(2)中，所述打孔器的直徑為1cm，所述搖床培養條件為pH＝4-8，20-32℃，120r/min，所述錐形瓶的裝液量為50mL-150mL/250mL。

8.權利要求2或權利要求3所述的具有抗植物病原菌和促進植物生長作用的發酵液或者采用權利要求4-7中任一項所述的制備方法制備得到的發酵液在制備農用助劑中的用途，其特征在于：所述農用助劑具有廣譜抗植物病原菌和促進植物生長作用。

9.根據權利要求8所述的用途，其特征在于：所述農用助劑是農藥和植物生長促進劑。

10.根據權利要求8所述的用途，其特征在于：所述農用助劑是藥肥。