[發明專利]一種檢測耐藥菌中β-內酰胺酶的近紅外熒光探針的制備

有效

• 申請號: 202211255743.4
• 申請日: 2022-10-13
• 公開（公告）號: CN115521324B
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發明（設計）人: 郭麗霞;劉文;田亞飛;李錦瑤;任國棟;馬素芳;張承武;李麗紅;刁海鵬;王浩江;王斌;閆麗麗
• 申請（專利權）人: 山西醫科大學
• 主分類號: C07D501/30
• 分類號: C07D501/30;C07D501/04;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 太原申立德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14115
• 代理人: 王芳

本發明涉及生物傳感技術領域，具體涉及一種檢測耐藥菌中β?內酰胺酶的近紅外熒光探針的制備。具體以2,3,3?三甲基?3H?吲哚為原料，經過親核取代得到1?(2?羧乙基)?2,3,3?三甲基?3H?吲哚，進一步經過縮合和取代反應得2?((E)?2?(((7S)?2?羧基?8?氧基?7?(2?苯乙酰胺)?5?硫?1?氮雜環[4.2.0]辛?2?烯?3?基)甲氧基)?2,3?二氫?1H?硫雜蒽?4?基)乙烯基)?1?(2?羧乙基)?3,3?二甲基?3H?吲哚?1?銨(CS?PA)。本發明得到的熒光探針是一個對耐藥菌產生的酶特異性響應的近紅外熒光探針；所采用的制備方法簡單，條件溫和；該探針通過響應部分與耐藥菌產生的β?內酰胺酶特異性結合，發射出近紅外的熒光，在耐藥菌檢測方面具有較高的應用價值。

技術領域

本發明涉及生物傳感技術領域，具體涉及一種檢測耐藥菌中β-內酰胺酶的近紅外熒光探針制備。

背景技術

自抗生素問世以來，挽救了數以億計的致病菌感染患者的生命。然而，隨著科技的發展和社會的進步，抗生素被大量的亂用和濫用，這就導致出現了耐藥菌，使得現有的抗生素失效，最后發展為多藥耐藥菌。產生分解抗生素的酶是細菌耐藥的一個重要的原因，其中最為常見的是β-內酰胺酶。β-內酰胺類抗生素由于其具有廣譜和高的抗菌性能，常作為治療致病菌感染的首選藥物。因此，快速高效地篩選出耐藥菌對于藥物的選擇具有重要的意義。

早期的診斷對于指導藥物的使用和降低耐多藥細菌感染的風險具有重要的意義。檢測細菌產生的酶是目前確診耐藥菌的一個有效的方法。然而目前已有的方法中，表型分析大多特異性低、敏感性低、耗時長，加重了患者耐多藥細菌感染的風險，聚合酶鏈反應(PCR)是成本較高，且無法檢測未知的基因。熒光分析是近年來來發展起來的新型檢測方法，具有操作簡單、靈敏度高、檢測速度快、成本低以及無創的原位成像能力等優點，正成為一種強有力的早期診斷體內外細菌感染是否為耐藥菌感染的方法。然而，目前已報道的探針的響應時間長，發射波長短，在生物體內的背景干擾比較大。因此，得到靈敏性和特異性高的近紅外熒光探針實現耐藥菌的檢測是本發明的宗旨。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測耐藥菌中β-內酰胺酶的近紅外熒光探針及其制備。

為了達到上述目的，本發明采用了下列技術方案：

一種檢測耐藥菌中β-內酰胺酶的近紅外熒光探針，其結構式為：

一種檢測耐藥菌中β-內酰胺酶的近紅外熒光探針的制備，包括如下步驟：

1)、將2,3,3-三甲基-3H-吲哚和3-溴丙酸在無溶劑的條件下攪拌反應，反應結束后，冷卻，反應物用二氯甲烷超聲溶解，之后用溶劑沉淀，重復三次，得到白色沉淀1-(2-羧乙基)-2,3,3-三甲基-3H-吲哚；反應式如下：

2)、將1-(2-羧乙基)-2,3,3-三甲基-3H-吲哚、(E)-2氯-3-(羥亞甲基)環己烯-1-甲醛、無水乙酸鈉和醋酸酐混合均勻后攪拌反應，反應結束后，減壓濃縮，然后倒入蒸餾水中，用二氯甲烷萃取，收集下層有機相，減壓濃縮，粗產物經硅膠柱層析純化，得到綠色固體1-(2-羧乙基)-2-((E)-2-(E)-3-(2-(E)-1-(2-羧乙基)-3,3-二甲基-2-亞甲基)亞乙烯)-2-氯環己基-1-烯-1-基)乙烯基)-3,3-二甲基-3H-吲哚；反應式如下：